文献类型：期刊文章

作　　者：马亚萍[1] 陈选静[1] 程金芝[2] 袁梦娇[1] 吴家红[2] 商正玲[1]

机构地区：[1]贵州医科大学基础医学院免疫学教研室 [2]贵州医科大学基础医学院病原生物学实验室,贵阳550025

出　　处：《寄生虫与医学昆虫学报》

基　　金：国家自然科学基金项目(81060138;81260260);贵州省省长基金项目(黔省专合字(2007)48号)

年　　份：2017

卷　　号：24

期　　号：2

起止页码：126-131

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：探讨Aalb_56 ku基因在白纹伊蚊(广州株)不同组织中的表达差异;对唾液腺中Aalb_56 ku基因进行克隆表达并探索其免疫原性。采用实时荧光定量RT-PCR法对雌蚊中肠、脂肪体、唾液腺不同组织中Aalb_56 ku基因的表达差异进行分析。针对Aalb_56 ku基因序列设计特异性引物,以唾液腺RNA为模板获得56 ku全长基因序列,构建重组质粒并测序,将测序序列进行生物信息学和抗原表位预测分析。IPTG诱导表达,亲和层析法纯化重组蛋白;制备小鼠特异性抗Aalb_56 ku蛋白抗血清。结果显示,Aalb_56 ku在白纹伊蚊(广州株)唾液腺(SG)中高表达。克隆所获唾液腺56 ku基因全长1 593 bp,可编码530个氨基酸,信息学分析提示该基因含有信号肽序列,等电点为8.40,抗原表位预测提示含有23个表位。p ET30a(+)-56 ku重组质粒可表达约56 k Da大小的融合蛋白,且呈包涵体形式表达,Western blotting鉴定具有His标签。纯化蛋白免疫Balb/c小鼠后可获得1∶100效价的特异性抗血清,提示该重组蛋白具有一定的免疫原性。

关 键 词：白蚊伊蚊  Aalb_56ku基因  重组蛋白 免疫原性

分 类 号：R384.1]