文献类型：期刊文章

作　　者：秦晓东[1,2] 楚熹橦[1] 鲁承[1] 孙福亮[1] 孙兴忠[1,3]

机构地区：[1]延边大学农学院,延吉133000 [2]敦化市动物检疫站,敦化133700 [3]白城市动物疫病预防控制中心,白城137000

出　　处：《中国畜牧兽医》

基　　金：延边大学青年基金项目(602016032)

年　　份：2017

卷　　号：44

期　　号：8

起止页码：2248-2254

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为检测熊源粪肠球菌心内膜炎抗原(EfaA)基因,用于快速检测东北黑熊粪肠球菌感染病例,本试验根据GenBank登录的粪肠球菌EfaA基因序列(登录号:U03756.1)合成了1对PCR引物,通过PCR法扩增合成长度为689bp的目的片段。将PCR产物克隆于pMD19-T载体,之后将其转入大肠杆菌DH5α感受态细胞筛选阳性克隆。提取扩增后的重组质粒pMD19-T-EfaA并进行PCR、酶切鉴定、序列测定及蛋白质结构预测。结果显示,本试验成功克隆出熊源粪肠球菌EfaA基因,与GenBank登录的ATCC 29212菌株同源性为100.0%。本试验成功构建了重组克隆载体pMD19-T-EfaA,并对测序结果进行了蛋白质结构的预测,为进一步建立黑熊粪肠球菌病的诊断方法提供了理论依据,同时也为黑熊疾病的防制奠定了基础。

关 键 词：东北黑熊  粪肠球菌心内膜炎抗原(EfaA)  基因克隆 生物信息学分析

分 类 号：S852.611]