文献类型：期刊文章

作　　者：任丽莉[1] 刘超[2] 刘乙蒙[2] 张苧兮[2] 肖建英[3]

机构地区：[1]锦州医科大学基础医学院神经生物学教研室,辽宁锦州121001 [2]锦州医科大学基础医学院发育生物学教研室,辽宁锦州121001 [3]锦州医科大学教务处,辽宁锦州121001

出　　处：《中国现代医生》

基　　金：国家自然科学基金资助课题(81270698、31371173、81401199);辽宁省科学技术计划项目(2015020697)

年　　份：2017

卷　　号：55

期　　号：22

起止页码：34-38

语　　种：中文

收录情况：IC、JST、RCCSE、普通刊

摘　　要：目的 探讨蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)激活剂双丁酰环腺苷酸(dual dibutyryl cyclic AMP,dbc AMP)调控蛋白激酶Wee1B蛋白对小鼠1-细胞期受精卵发育的影响,为进一步研究母源性因子Wee1B在早期胚胎发育过程中的作用提供理论基础。方法将2 mmol/L dbc AMP作用于小鼠1-细胞期受精卵1 h,并显微注射Wee1Bm RNAs,实验分为未注射组、TE缓冲液注射组、Wee1B-WT/KD注射组、Wee1B-S15A/D注射组,继续在M16培养基中培养。相差显微镜下观察小鼠受精卵的形态变化和卵裂情况,放射自显影测定各期细胞有丝分裂促进因子(MPF)活性,Western blotting方法检测Wee1B蛋白的表达、CDC2-p Tyr15和Wee1B-p Ser15的磷酸化水平。结果小鼠受精卵在有dbc AMP存在时,G_1、S、G_2和M各细胞周期均检测到磷酸化的Wee1B表达,非磷酸化条带在G_2期和M期才能检测到;各组受精卵卵裂出现时间延迟,卵裂率显著降低;h CG注射后35 h内,MPF活性一直处于低水平,CDC2-p Tyr15磷酸化状态和MPF活性变化趋势相一致。结论dbc AMP激活PKA后,PKA磷酸化Wee1B蛋白的S15位点,Wee1B活性增加,阻滞受精卵分裂,本研究提示Wee1B蛋白的S15位点可能是PKA作用的生理靶点,可以更好地认识早期胚胎发育的分子事件。

关 键 词：WeelB  双丁酰环腺苷酸  蛋白激酶A 有丝分裂促进因子  小鼠受精卵

分 类 号：Q954.4]