文献类型：期刊文章

作　　者：牟小会[1] 郑祎扬[2] 韦艳[2] 颜凤[1] 程金芝[1] 吕清巧[1] 商正玲[3] 吴家红[1]

机构地区：[1]贵州医科大学基础医学院现代病原生物学实验室,贵州贵阳550025 [2]贵州医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室 [3]贵州医科大学基础医学院免疫学教研室

出　　处：《中国公共卫生》

基　　金：贵州省科技厅基础平台建设项目(黔科平台[2012(4006)]);贵州省社会发展科技公关项目(黔科合SY字[2009]3056)

年　　份：2017

卷　　号：33

期　　号：7

起止页码：1074-1078

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD_E2017_2018、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的建立一种针对登革2型病毒(DENV-2)的快速、灵敏、特异的检测方法。方法从Gen Bank下载105株DENV-2病毒毒株全基因序列,应用生物软件Bioedit进行比对分析筛选出保守序列,在保守区域设计特异引物和探针,建立检测DENV-2的TaqMan荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法。结果该方法检测灵敏度达到102copies/μL;特异性验证中除登革2型病毒有明显扩增外,与墨累谷脑炎病毒、西尼罗病毒、蜱传脑炎病毒、登革病毒1、3、4型、黄热病毒和科萨努尔森林病毒、乙型脑炎病毒均无交叉反应。重复性实验结果表明该方法的组间和组内的变异系数(CV)均<2%。对人工感染DENV-2的87只蚊虫标本进行比对实验,结果荧光定量RT-PCR检测出56份阳性,传统RT-PCR只检测出16份阳性,差异有统计学意义(χ~2=37.908,P=0.000)。结论 TaqMan荧光定量RT-PCR方法检测DENV-2,特异性强、敏感性高。

关 键 词：登革2型病毒(DENV-2)  TaqMan荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)  检测  标准品

分 类 号：R373.3]