文献类型：期刊文章

作　　者：王晓菲[1] 贾润清[1] 周玉柏[1] 管永军[1] 曾毅[2]

机构地区：[1]北京工业大学生命科学与生物工程学院药物研究所,100124 [2]中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验,北京100052

出　　处：《中华实验和临床病毒学杂志》

年　　份：2017

卷　　号：31

期　　号：3

起止页码：198-201

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2017_2018、JST、PUBMED、SCOPUS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的 构建HIV-1中和抗体全基因共表达真核质粒载体,观察其在293T细胞中的表达并检测其活性.方法 合成HIV-1中和抗体2G12轻链可变区（VL）和重链可变区（VH）,与含人IgG轻、重链恒定区的载体分别连接,构建出完整的2G12轻链和重链的载体,通过PCR扩增与连接将2G12轻、重链全长构建到真核表达载体pVR中,同时将内部核糖体进入位点（Internal ribosome entry site,IRES）插入到此载体中构建双基因表达系统,重组质粒转染293T细胞进行瞬时表达,ELISA检测抗体表达效果,通过结合实验及中和实验检测细胞上清的结合活性和中和活性.结果 获得可表达人IgG的重组双基因真核表达载体,转染后上清的抗体表达量为6.43 μg/ml,并且抗体保留了原来的结合活性和中和活性.结论 所构建的载体可表达具有较好的结合活性和中和活性的抗体,本研究为真核表达载体表达人HIV中和抗体全基因方面提供了可选择的平台.

关 键 词：HIV 中和抗体 DNA载体  

分 类 号：R392-33]