文献类型：期刊文章

作　　者：李金斗[1] 钱晶[1] 丁佳欣[1] 徐小洪[1] 秦岭松[1] 黄蕾[1] 武淑婷[1] 丁伟[1] 尹仁福[1] 丁壮[1]

机构地区：[1]吉林大学动物医学学院人兽共患病研究教育部重点实验室,吉林长春130062

出　　处：《中国兽医学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31472195;31402195);国家公益性行业(农业)科研专项资助项目(201303033);吉林大学大学生创新创业训练资助项目(2016B81820)

年　　份：2017

卷　　号：37

期　　号：6

起止页码：969-975

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2017_2018、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：当前嵌合病毒样颗粒(chimeric VLPs,cVLPs)策略主要基于融合序列的基因转染水平,但该方法存在多基因表达操控困难、锚定蛋白无法定量等问题。糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)是一种蛋白与细胞膜结合的方式,改造的GPI锚定蛋白可以被定量嵌合至真核细胞膜表面。因此,本研究以可溶性蛋白、Ⅰ型跨膜蛋白、Ⅱ型跨膜蛋白为嵌合对象,以GPI锚定方式将外源蛋白嵌合至新城疫病毒样颗粒(NDV VLPs)表面。流式细胞术检测可见GPI锚定蛋白可锚定至各真核细胞表面,并且与孵育时间呈正相关性;各组装GPI-cVLPs在电镜观察下具有完整的病毒粒子结构,与野生型NDV相似;经Western blot检测分析各GPI-cVLPs与NDV阳性血清和His单抗发生反应。综上,该GPI锚定策略能有效将外源蛋白嵌合至NDV VLPs,可为NDV VLP载体平台的应用奠定基础。

关 键 词：GPI锚定蛋白  嵌合 新城疫病毒样颗粒  组装  

分 类 号：S852.65]