文献类型：期刊文章

作　　者：孙正浩[1,2,3] 刘彦会[1,2,3] 刘骏达[1,2,3] 徐丹丹[1,2,3] 李小枫[1,2,3] 张义龙[1,2,3] 孟晓明[1,2,3] 黄成[1,2,3] 李俊[1,2,3]

机构地区：[1]安徽医科大学药学院,安徽省重大自身免疫性疾病重点实验室,安徽省创新药物产业共性技术研究院 [2]抗炎免疫药物教育部重点实验室 [3]安徽医科大学肝病研究所,安徽合肥230032

出　　处：《中国药理学通报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No 81273526,81473268);安徽省教育厅重点基金项目(No KJ2016A364,KJ2016A365);安徽省自然科学基金面上项目(No21408085MKL31)

年　　份：2017

卷　　号：33

期　　号：6

起止页码：781-787

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的研究5-(4-氯苯乙基)亚胺基-7-氧-乙酰-4-氯苯乙胺基橙皮素,即橙皮素衍生物XIV号(hesperidin derivative-XIV,HDND-XIV)对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠成纤维滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)炎症的影响及分子机制。方法弗氏完全佐剂(Freund's complete adjuvant,FCA)诱导Sprague Dawley(SD)大鼠AA模型(FCA,0.01 ml·kg^(-1)),造模后24 d处理并提取原代FLS;MTT法检测HDND-XIV的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50));酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定细胞培养基中FLS分泌的白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)和白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平;Lipofectamine2000转染试剂盒将过表达质粒GV230-MeCP2转染入AA FLS;Western blot法检测MeCP2、PTCH1、Gli1、Shh蛋白的表达;焦磷酸测序法定量检测各组PTCH1基因的甲基化程度。结果 MTT法检测HDND-XIV在FLS上的IC_(50)值为161μmol·L^(-1);ELISA筛选出HDND-XIV最佳抗炎浓度为10μmol·L^(-1);Western blot结果显示经HDND-XIV刺激后,AA FLS中PTCH1表达升高,MeCP2、Gli1和Shh表达下降;焦磷酸测序显示经HDND-XIV刺激后,AA FLS中PTCH1基因甲基化程度明显降低;在AA FLS中过表达MeCP2后加HDND-14刺激,Western blot结果显示成功过表达MeCP2后,PTCH1蛋白表达下降,而Gli1和Shh蛋白表达升高,ELISA结果显示IL-6、IL-1β、TNF-α水平也升高。结论 HDND-XIV对于FLS有较明显的抗炎活性,其机制可能与抑制MeCP2的表达,降低PTCH1基因甲基化程度有关。

关 键 词：HDND-XIV  SD大鼠  佐剂性关节炎 甲基化  HEDGEHOG 成纤维滑膜细胞  过表达  炎症

分 类 号：R-332] R285.5