文献类型：期刊文章

作　　者：吴丽娟[1,2] 赵芳[2] 刘光万[2] 曲洪媛[2] 杨旭霞[2] 廖囡囡[1,2] 陈丽[1,2] 杨光[1] 吴昌琳[1,2]

机构地区：[1]华东师范大学物理系上海磁共振重点实验室,上海200062 [2]苏州博创康源生物技术有限公司,江苏苏州215300

出　　处：《中国生物制品学杂志》

年　　份：2017

卷　　号：30

期　　号：4

起止页码：372-376

语　　种：中文

收录情况：AJ、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2017_2018、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的分析一种siRNA药物载体薄膜在溶液中的稳定性,并评价其基因沉默效应。方法利用层层自组装(layer-by-layer self-assembly,LBL)技术制备壳聚糖(chitosan,CHS)-透明质酸(hyaluronic acid,HA)-siRNA多层薄膜。通过UV-vis吸光度法对siRNA在薄膜上的生长过程以及在不同缓释液中的稳定性分别进行验证。结合荧光图像和流式细胞术,采用直接与细胞接触的方式检测该siRNA载体薄膜的HEK293T细胞转染效应。结果 CHS-HA-siRNA多层薄膜在260 nm处有很强的吸收峰,且随着含siRNA的组装层数的增加,在260 nm的吸光度值越大。该siRNA载体薄膜在1 mol/L NaCl溶液中释放效果最好,在pH 7.4的PBS缓冲液中次之,在纯水中稳定性最好。过低或过高的盐离子浓度对促进薄膜的崩解无优势。阳性对照组7-eGFP-siRNA和2-eGFP-siRNA具有较好的沉默绿色荧光蛋白基因的效应;在细胞培养2 d后的转染试验中,阳性对照组7-eGFP-siRNA较2-eGFP-siRNA组显示出更强的基因沉默效应。结论成功构建了一种非病毒siRNA递送载体系统,为未来实现siRNA局部给药开辟了一条可行的途径。

关 键 词：siRNA递送  层层自组装 壳聚糖-透明质酸-siRNA多层薄膜  基因沉默效应  

分 类 号：Q789]