文献类型：期刊文章

作　　者：贾坤[1] 韩太光[1] 远立国[1] 孙凌霜[1] 宁章勇[1] 王衡[1] 李守军[1]

机构地区：[1]华南农业大学兽医学院/广东省兽医临床重大疾病综合防控重点实验室/广东省宠物工程技术研究中心,广东广州510642

出　　处：《华南农业大学学报》

基　　金：广东省科技计划(2015B020203005;2015A020224039);广东省现代农业科技创新联盟建设项目(2016LM2150);广州市珠江科技新星专项(201610010073)

年　　份：2017

卷　　号：38

期　　号：3

起止页码：15-20

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：【目的】建立一种能够快速、简便、可视化地检测牛流行热病毒的分子生物学方法。【方法】根据牛流行热病毒G蛋白基因的6个保守区域设计2对引物,建立牛流行热病毒可视化逆转录环介导等温扩增(Reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)检测技术,优化RT-LAMP的反应条件,将其与PCR方法进行比较。【结果】当Mg2+浓度为3 mmol·L^(-1)、甜菜碱浓度为0.4 mol·L^(-1)、d NTPs mix浓度为1.2μmol·L^(-1)、内外引物浓度比例为8∶1、反应温度为63℃时,反应梯形条带最明显,在反应40 min后可以观察到明显的梯形条带。建立的RT-LAMP检测方法特异性好,只对牛流行热病毒进行扩增;灵敏度比普通PCR高10倍。【结论】该方法操作简便,特异性强,结果判读方便,可用于牛流行热的快速检测。

关 键 词：牛流行热 病毒检测 RT—LAMP  PCR  灵敏性 特异性  

分 类 号：S854] S855[动物医学类]