文献类型：期刊文章

作　　者：张爱玲[1,2] 孙显月[2] 卢孝璋[2] 李加琪[2] 张豪[2]

机构地区：[1]广东第二师范学院生物与食品工程学院/广东高校应用生态工程技术开发中心,广东广州510303 [2]华南农业大学动物科学学院/广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室,广东广州510642

出　　处：《华南农业大学学报》

基　　金：国家自然科学基金(31201771);现代农业产业技术体系专项(CARS-36)

年　　份：2017

卷　　号：38

期　　号：3

起止页码：1-8

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：【目的】获得猪FAM213B基因完整mRNA和启动子序列,研究猪FAM213B基因表达,为探讨母猪妊娠的建立和胚胎发育调控机制奠定基础。【方法】通过5'RACE和3'RACE技术,获得基因完整mRNA序列,分析不同物种该基因氨基酸序列相似性;通过PCR克隆启动子区,并通过双荧光素酶报告基因载体系统转染猪子宫内膜细胞,研究其转录活性。【结果】猪FAM213B基因mRNA全长808 bp,其中5'UTR、CDS区和3'UTR长度分别为67、609(含终止密码子)和132 bp(不含poly A序列),在17~106位氨基酸之间存在硫氧还蛋白折叠结构域;与猪FAM213B基因其他2个潜在转录本相比,三者都包含硫氧还蛋白折叠结构域,但蛋白三级结构存在较大差异;猪FAM213B氨基酸序列与山羊、牛和绵羊高度相似,相似性分别为94.03%、93.03%和91.54%。克隆获得2 261 bp(-2 231/+30)的基因启动子序列,将其连接至双荧光素酶报告基因载体,转染猪子宫内膜细胞,发现获得的启动子片段能够启动下游报告基因的转录,在启动子区存在潜在的典型NFκB等转录因子结合位点。【结论】本研究获得猪FAM213B基因转录本长度为808 bp,其蛋白存在硫氧还蛋白折叠功能结构域,其启动子序列(-2 231/+30)在猪子宫内膜细胞中具有较强的转录活性。

关 键 词：猪  FAM213B基因  转录 启动子 克隆  子宫内膜细胞 硫氧还蛋白

分 类 号：S828]