文献类型：期刊文章

作　　者：楚鹰[1] 宫祥丹[2] 高建伟[2] 苏艾荣[2] 陈德燕[2] 宋红勇[2] 吴喜林[2] 吴稚伟[2]

机构地区：[1]江苏大学附属武进医院中心实验室,江苏常州213017 [2]南京大学医学院公共健康医学中心,江苏南京210093

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》

基　　金：国家重点研发计划(2016YFC1201000);国家科技重大专项(2016ZX10001005003);江苏省产学研项目(BY2015069-02);常州市卫生计生委青年科技项目(QN201505);常州市武进区科技项目(WS201402);2015年度江苏省"双创博士"计划;常州市高层次卫生人才培养计划(2016CZBJ060)

年　　份：2017

卷　　号：33

期　　号：4

起止页码：540-545

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的真核表达人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF01_AE重组型gp120蛋白的V1/V2结构域,制备其单克隆抗体并鉴定其抗原反应性。方法构建pTriEx-3-V1/V2CNE55真核表达载体,在HEK293F细胞中表达V1/V2-His融合蛋白,纯化后作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA筛选分泌抗V1/V2重组蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤,对单克隆抗体的特异性、型别以及效价进行鉴定。结果制备并获得一株稳定分泌抗HIV-1 AE亚型V1/V2结构域单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA测定腹水效价高达1∶81 000,单克隆抗体类型属于IgG1/κ型。Western blot结果表明该单克隆抗体同样能够识别不同亚型的HIV gp120蛋白。结论成功制备出抗HIV-1 AE重组型gp120蛋白V1/V2结构域的单克隆抗体。

关 键 词：人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)  gp120可变区1/2  单克隆抗体 真核蛋白表达  疫苗  

分 类 号：Q813.2[生物工程类] R392.11]