文献类型：期刊文章

作　　者：王以婷[1] 杨卫红[1] 赵云龙[1,2] 曾昭书[1] 张莉蓉[3]

机构地区：[1]郑州大学基础医学院法医学系,河南郑州450001 [2]焦作市第二人民医院病理科,河南焦作454001 [3]郑州大学基础医学院药理学系,河南郑州450001

出　　处：《昆明医科大学学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81173127);河南省杰出青年基金资助项目(074100510020);河南省教育厅基础研究基金资助项目(13A310663);河南省科技厅基础与前沿技术研究计划基金资助项目(142300410206);河南省科技攻关计划基金资助项目(162102310523)

年　　份：2017

卷　　号：38

期　　号：1

起止页码：13-17

语　　种：中文

收录情况：CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的探讨CYP3A4内含子10及其内SNP CYP3A4*1G对CYP3A4基因表达的调控作用.方法构建CYP3A4启动子启动转录的CYP3A4真核表达质粒,将CYP3A4内含子10(CYP3A4*1G野生型/突变型)正向或反向插入该质粒的启动子上游,从而构建出不同基因型、不同方向的CYP3A4内含子10调控的CYP3A4真核表达质粒.将构建好的各质粒分别转染入Hep G2细胞,应用实时荧光定量PCR方法检测CYP3A4 m RNA表达水平.结果构建的重组质粒经酶切验证与测序鉴定,插入片段的序列和方向与预期完全一致.无论CYP3A4*1G野生型还是突变型,反向组CYP3A4 m RNA表达水平均高于正向组(P<0.01);而CYP3A4内含子10无论是正向还是反向,CYP3A4*1G野生型组CYP3A4 m RNA表达水平均高于突变型组(P<0.01).此外,正向突变组CYP3A4 m RNA表达水平低于阳性对照组,不但没有增强CYP3A4启动子的转录作用反而有所减弱.结论CYP3A4内含子10有类似于增强子的功能,能够影响CYP3A4启动子对CYP3A4基因的转录,且具有方向性和CYP3A4*1G等位基因依赖性.

关 键 词：内含子 CYP3A4＊1G  真核表达载体

分 类 号：R394.6] R968[基础医学类]