文献类型：期刊文章

作　　者：李信志[1] 卢争辉[1] 周玉玲[1] 李世宇[1] 张桂敏[1]

Xinzhi Li Zhenghui Lu Yuling Zhou Shiyu Li and Guimin Zhang(Bioresources Green Transformation Collaborative Innovation Center of Hubei Province, College of Life Sciences, Hubei University Wuhan 430062, Hubei, Chin)

机构地区：[1]湖北大学生命科学学院生物资源绿色转化湖北省协同创新中心,湖北武汉430062

出　　处：《生物工程学报》

基　　金：国家自然科学基金(No.31670069);国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2014AA021303-04)资助~~

年　　份：2017

卷　　号：33

期　　号：4

起止页码：692-698

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2014、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2017_2018、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：枯草芽孢杆菌是一种革兰氏阳性好氧细菌,因其安全性和高分泌特性,已被广泛用作异源蛋白的表达宿主。然而,相比大肠杆菌,枯草芽孢杆菌的转化效率低,限制了其作为宿主的异源蛋白的定向进化。本文通过改变培养基、诱导剂浓度、质粒类型等参数优化感受态制备的条件,利用常规质粒进行转化,结果表明,用营养丰富的YN培养基替代常规LB培养基制备感受态,可以使转化效率提高4倍左右;加入1.5%的木糖诱导2 h,感受态的转化效率又提高2倍左右;用大肠杆菌Escherichia coli GM272来源的质粒又可进一步提高转化效率3倍左右。综合最优条件制备SCK6的感受态,转化整合型质粒pDG1730,效率可以达到10~6 CFU/μg,相对未优化的条件提高了2个数量级,为基于枯草芽孢杆菌的酶的定向进化和代谢工程奠定了基础。

关 键 词：枯草芽孢杆菌 ComK基因  木糖 感受态 pDG1730  

分 类 号：Q93]