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磁珠法自动化纯化现场检材DNA方法研究
The study for the DNA case work sample purification by the automated DNA extraction system with magnetic beads
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]南通市公安局,江苏南通226007
基 金:江苏省公安厅科研在重点项目(2016KF018Z)
年 份:2017
卷 号:32
期 号:1
起止页码:9-12
语 种:中文
收录情况:CSCD、CSCD_E2017_2018、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、ZGKJHX、普通刊
摘 要:目的利用TE-MAGS在TECAN工作站上结合磁珠试剂盒,建立自动化工作站批量纯化现场检材DNA的方法,并探讨其在法医物证检案中的应用。方法灵敏度测试:标准品使用0.1ng/μL 9947A,用200μL TES稀释制备DNA总量0.1ng^1ng共10种的标准样品,采用本文方法提取纯化,使用IdentifilerTM试剂盒扩增,用3130XL型测序仪检测,Gene Mapper ID-X分析,分析STR图谱质量;纯化能力测试:在1ng总量的标准样品中加入腐殖酸、血红素,采用本文方法提取纯化、扩增检测,分析STR图谱质量;实际案件应用对比:收集304份现场检材,分别采用本方法和硅珠法进行提取纯化,经扩增检测,统计对比两种提取纯化方法 STR分型成功率。结果灵敏度测试:0.1ng^0.2ng总量标准样品提取的DNA模板,扩增后可检测到部分基因座STR图谱,0.3ng^1ng总量标准样品提取的DNA模板,扩增后可以得到完整的STR图谱;纯化能力测试:对混合有一定浓度的腐殖酸、血红素的标准样品的提取产物检测图谱未见明显抑制;实际案件应用对比测试:304份现场检材工作站磁珠法检出成功率(50%)高于硅珠法(40.8%)。结论本文所建立的方法缓冲范围较大,回收率高,纯化能力强,提取产物STR分型成功率高,适合现场检材批量化DNA检验。
关 键 词:法医物证学 自动化批量纯化DNA 磁珠法 TE-MAGS
分 类 号:D919.4[法医学类]
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