文献类型：期刊文章

作　　者：高羽亭[1] 杜进林[1] 杨慧[1] 唐焕文[1]

机构地区：[1]广东医科大学公共卫生学院,东莞市环境医学重点实验室,广东东莞523808

出　　处：《中国职业医学》

基　　金：国家自然科学基金(81273116);广东省自然科学基金(2015A030310532);广东省医学科研基金(A2016246,A2014468);广东医科大学科研基金(2XB13012)

年　　份：2017

卷　　号：44

期　　号：1

起止页码：36-41

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、RCCSE、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨沉默聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)对氢醌所致大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)凋亡的影响。方法①PARP-1基因RNA干扰表达质粒转染BMMSCs后,经新霉素筛选获得PARP-1沉默BMMSCs,以免疫印迹法鉴定所构建的细胞。②以空载体BMMSCs为对照组,以PARP-1沉默BMMSCs为实验组。分别以质量浓度为0.0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、80.0、160.0和320.0μmol/L的氢醌(溶于磷酸盐缓冲液)作用于2组细胞24 h,以噻唑蓝法检测细胞活力,根据细胞活力检测结果选择后续实验氢醌染毒剂量。③以浓度为0.0~20.0μmol/L的氢醌作用于2组细胞24 h后,以流式细胞技术检测细胞凋亡情况,以实时荧光定量-聚合酶链反应检测PARP-1 mRNA表达情况。结果①用质量浓度为400 mg/L的新霉素成功筛选出PARP-1沉默BMMSCs和空载体BMMSCs,PARP-1沉默BMMSCs中PARP-1蛋白表达量较BMMSCs下降85.00%,成功建立PARP-1沉默细胞。②根据细胞活力检测结果,后续实验选择氢醌染毒剂量为0.0~20.0μmol/L。3与氢醌染毒剂量为0.0μmol/L时比较,对照组及实验组细胞早期凋亡率分别在氢醌染毒剂量为10.0和5.0μmol/L时即出现有统计学意义的升高(P<0.05);且在浓度为0.0~10.0μmol/L时,随着氢醌染毒剂量的增加,2组细胞早期凋亡率均增加(P<0.01),均呈剂量-效应关系。③与氢醌染毒剂量为0.0μmol/L比较,对照组和实验组细胞的PARP-1 mRNA相对表达水平均在氢醌染毒剂量为5.0μmol/L时即出现有统计学意义的升高(P<0.05),且在每个氢醌染毒剂量下实验组细胞PARP-1 mRNA相对表达水平均低于对照组(P<0.05);在浓度为0.0~20.0μmol/L时,随着氢醌染毒剂量的增加,2组细胞PARP-1 mRNA相对表达水平均增加(P<0.01),均呈剂量-效应关系。结论 PARP-1沉默BMMSCs在氢醌作用下更易发生凋亡,PARP-1可能参与了氢醌诱导的细胞凋亡。

关 键 词：聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1  氢醌 骨髓间充质干细胞 凋亡 大鼠  

分 类 号：R135.1] R114[公共卫生与预防医学类]