文献类型：期刊文章

作　　者：蔡湾湾[1] 陈发[1] 万永奇[1] 吴秀山[1] 邓云[1] 袁婺洲[1]

CAI Wanwan CHEN Fa WAN Yongqi WU Xiushan DENG Yun YUAN Wuzhou(The Center for Heart Development, Key Lab of MOE for Development Biology and Protein Chemistry, College of Life Sciences, Hunan Normal University, Changsha 410081, Hunan, China)

机构地区：[1]湖南师范大学生命科学学院蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心,湖南长沙410081

出　　处：《激光生物学报》

基　　金：国家自然科学基金(81170229;81370451;31472060;81170088);湖南省研究生科研创新基金(CX2011B195);湖南省生物发育工程及新产品研发协同创新中心(2013-448-6)

年　　份：2016

卷　　号：25

期　　号：6

起止页码：546-552

语　　种：中文

收录情况：CAS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：TALEN(transcription activator-like effector nuclease)打靶是一种定向敲除基因技术,利用该技术能解决目前在斑马鱼体内难以进行基因敲除的难题。Klhl31是本实验室鉴定的人类心脏发育候选基因,且目前国内外尚无斑马鱼Klhl31敲除品系。为了在斑马鱼的整体水平鉴定Klhl31的生物学功能,我们利用TALEN打靶技术建立斑马鱼Klhl31基因敲除品系。酶切验证的结果显示,注射了TALEN表达质粒的胚胎在酶切位点处发生了基因突变,该突变破坏了酶切位点导致酶切出现阳性结果,证明了TALEN打靶的有效性。对F0代突变体成鱼的筛选过程中,经酶切验证,同样出现了阳性结果。这些结果说明用TALEN这种技术成功敲除了斑马鱼Klhl31基因,获得了Klhl31基因敲除的嵌合体斑马鱼。

关 键 词：Klhl31  TALEN 基因突变  酶切位点 基因敲除

分 类 号：Q78]