文献类型：期刊文章

作　　者：严闯[1] 尹李峰[1] 周玉玲[1] 张桂敏[1]

机构地区：[1]湖北大学生命科学学院生物资源绿色转化湖北省协同创新中心,湖北武汉430062

出　　处：《广西科学》

基　　金：国家"863"高科技项目(2012AA022203C)资助

年　　份：2017

卷　　号：24

期　　号：1

起止页码：100-105

语　　种：中文

收录情况：CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：【目的】研究极端耐热耐碱的木聚糖酶,使其能够满足造纸行业中碱性高温的苛刻环境。【方法】将一种来源于嗜碱芽孢杆菌S7的耐热耐碱内切木聚糖酶基因(xyn10A)密码子进行优化,基因合成后克隆至pHBM905BDM载体上,并转化毕赤酵母GS115菌株。【结果】木聚糖酶基因(xyn10A)优化后与原始序列比对相似性为76.70%。基因合成后克隆到pHBM905BDM载体上,并成功转化毕赤酵母GS115菌株。通过交联木聚糖底物平板水解圈法初筛及摇瓶复筛得到一株产酶量较高的菌株,且其在摇瓶发酵第10天达到最高酶活力,为495U/mL。另外,糖基化分析表明该酶在毕赤酵母中表达时被糖基化修饰。【结论】密码子优化后的极端耐热耐碱木聚糖酶基因在毕赤酵母中成功表达。

关 键 词：嗜碱芽孢杆菌内切木聚糖酶  基因优化  表达  毕赤酵母

分 类 号：Q786]