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鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2) ORF25蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备
Prokaryotic expression and preparation of monoclonal antibody against ORF25 protein of cyprinid herpesvirus Ⅱ
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]华中农业大学水产学院/淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心,武汉430070 [2]中国水产科学研究院长江水产研究所,武汉430223
基 金:湖北省科技支撑计划项目(2015BBA234);中央高校基本科研业务费专项(2013PY071)
年 份:2017
卷 号:36
期 号:2
起止页码:96-101
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊
摘 要:利用PCR方法扩增鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)ORF25基因的部分基因序列,并将扩增产物连接到原核表达载体pGEX-KG,成功构建了CyHV-2-ORF25-KG重组质粒。IPTG将其诱导后,SDS-PAGE分析表明:目的蛋白得到表达,分子质量大小为42ku,且主要以包涵体形式存在;用纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,多次免疫后通过细胞融合,筛选出1株单抗5C6;经间接免疫荧光试验和Western blot试验验证,这株单抗可以识别CyHV-2ORF25蛋白。
关 键 词:鲤疱疹病毒Ⅱ型 ORF25蛋白 原核表达 单克隆抗体
分 类 号:Q786]
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