文献类型：期刊文章

作　　者：王慧[1] 齐文静[1] 何黎[1] 郭宝平[1] 张文宝[1] 李军[1]

WANG Hui QI Wen-jing HE Li GUO Bao-ping ZHANG Wen-bao LI Jun(Base to Foster a State Key Lab for Major Disease Research in Xinjiang and Xinjiang Key Laboratory of Echinococcosis, First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Chin)

机构地区：[1]新疆医科大学第一附属医院,新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地,新疆包虫病基础医学重点实验室,新疆乌鲁木齐830054

出　　处：《中国病原生物学杂志》

基　　金：国家自然科学基金项目(No.U1303203)

年　　份：2017

卷　　号：12

期　　号：1

起止页码：38-41

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CSCD、CSCD_E2017_2018、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的构建细粒棘球绦虫成虫相关基因EgM123基因原核表达载体,诱导表达并鉴定EgM123蛋白。方法提取pET41b-EgM123重组质粒,以此为模板PCR扩增EgM123基因片段,克隆至原核表达载体pET28a中,经限制性内切酶双酶切和测序鉴定。将重组菌质粒转化大肠埃希菌BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的基因表达,采用SDS-PAGE对表达蛋白进行分析,Western blot鉴定其免疫反应性。结果 PCR扩增EgM123基因片段长度为594bp,经酶切分析和测序鉴定证明pET28a-EgM123原核表达载体构建正确。重组质粒转化BL21在37℃条件下,经IPTG(终浓度为0.4mmol/L)诱导3h,获得分子质量单位约为29ku的EgM123蛋白,与理论值相符。该蛋白能被EgM123-GST免疫兔抗血清识别。结论成功构建了pET28a-EgM123原核表达载体,表达蛋白具有免疫反应性,为研制包虫病疫苗奠定了基础。

关 键 词：包虫病 细粒棘球绦虫 EgM123  蛋白表达 疫苗  

分 类 号：R383.33]