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环介导等温扩增与实时荧光定量PCR检测布鲁氏菌的比较
Comparison of the detection of Brucella by loop-mediated isothermal amplification and real-time PCR
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]新疆医科大学第一附属医院,新疆重大疾病医学重点实验室-省部共建国家重点实验室,新疆乌鲁木齐830011 [2]新疆医科大学基础医学院
基 金:新疆医科大学第一附属医院基金项目(No.2013zrqn35)
年 份:2016
卷 号:11
期 号:12
起止页码:1070-1073
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2014、CAB、CSCD、CSCD_E2015_2016、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的 为快速、特异、灵敏的检测和鉴定布鲁氏菌,本研究依据环介导等温扩增技术与实时荧光定量PCR技术原理设计引物,建立两种检测布鲁氏菌的方法并进行评价。方法 根据布鲁氏菌OMP31基因序列设计6条LAMP引物和2条Real-time PCR引物,对新疆医科大学第一附属医院院确诊的10例布鲁氏菌病患者全血标本进行DNA检测。LAMP反应前加入羟基萘芬蓝(HNB)作为扩增指示剂,根据指示剂的颜色变化判定结果,并比较两种方法的特异性及灵敏度差异。结果 LAMP反应只需30-60min完成,在检测特异性和灵敏度方面两者结果相同,均能检出100个拷贝数的质粒DNA,且均无假阳性。结论 LAMP方法快速、简便,经济,无需专用仪器设备,更适用于基层医院对布鲁氏菌的快速检测。
关 键 词:布鲁氏菌 环介导等温扩增 REAL-TIME PCR OMP31基因
分 类 号:R378.5]
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