文献类型：期刊文章

作　　者：渠香云[1,2] 程燚睿[1] 高鹏[2] 朱远远[2] 董肇楠[2] 王弢[2] 夏伟梁[1]

机构地区：[1]上海交通大学生物医学工程学院&Med-X研究院,上海200030 [2]江苏省肿瘤分子诊断工程技术研究中心,江苏苏州215123

出　　处：《肿瘤》

基　　金："精准医学研究"国家重点专项资助项目(编号:2016YFC0906400);上海交通大学医工交叉重点项目资助项目(编号:YG2012ZD05)~~

年　　份：2016

卷　　号：36

期　　号：11

起止页码：1225-1232

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2015_2016、DOAJ、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的 :构建一种采用聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)富集血清中外泌体并进行分离的方法。方法:分别采用PEG8000、商品化EXOQuick试剂盒以及超速离心法富集血清外泌体。采用透射电子显微镜和Nano Sight NS90法对分离得到的外泌体的粒径进行检测。蛋白质印迹法比较3种方法获得的血清外泌体表面标志物CD9表达的丰度;实时荧光定量PCR法检测乳腺癌、乳腺良性病变及健康志愿者血清和血清外泌体中微RNA-21(micro RNA-21,mi R-21)的表达趋势。结果 :本研究构建获得的PEG分离外泌体的方法,在粒径分布和外泌体表面标志物CD9表达丰度方面,优于超速离心法,与商品化的EXOQuick试剂盒效果相当。PEG法富集获得的乳腺癌患者血清外泌体中mi R-21的表达水平较乳腺良性病变明显上调(P=0.024),上调倍数为2.68倍;而直接从血清中检测mi R-21在乳腺疾病患者血清中表达水平的结果显示,乳腺癌患者和乳腺良性病变患者基本没有变化(P=0.373))。结论 :本研究构建的外泌体富集试剂及其方法,操作简便、耗时短、成本低。与直接检测血清中mi RNA的表达水平相比,可明显增加检测效率。

关 键 词：乳腺肿瘤 外泌体 聚乙烯二醇类 临床实验室技术 微RNAS

分 类 号：R730.43]