文献类型：期刊文章

作　　者：李曼妮[1] 刘建平[1] 陶永胜[1] 陈静波[1] 陈馨馨[1] 谭志琴[2]

机构地区：[1]公安边防部队总医院,广东深圳518029 [2]湖南师范大学附属湘南医院

出　　处：《山东医药》

基　　金：湖南省卫生厅课题(B2014-067)

年　　份：2016

卷　　号：56

期　　号：41

起止页码：10-13

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、IC、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨miR-185对肝癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法用Target scan human在线软件预测miR-185调控的靶基因;采用荧光素酶报告载体系统检测miR-185对M2型丙酮酸激酶(PKM2)3'UTR荧光酶活性的影响;蛋白质印迹法检测miR-185对PKM2蛋白表达的影响。将肝癌HepG2细胞分为观察1组、对照1组、观察2组、对照2组、观察3组。观察1组转染miR-185 mimics,对照1组转染Scramble;观察2组转染PKM2-siRNA,对照2组转染Control-siRNA;观察3组转染miR-185 inhibitors与PKM2-siRNA。采用MTT法检测上述5组细胞增殖能力,采用Annexin V-FITC和PI染色法检测上述5组细胞凋亡率。结果在线预测软件发现miR-185与PKM2的3'UTR有共同的结合位点,荧光素酶报告载体系统显示在Hep G2细胞中miR-185能抑制Wild-PKM2报告质粒组荧光素酶的活性,Western blotting结果显示miR-185能下调Hep G2细胞中PKM2蛋白表达,证实PKM2是miR-185直接调控的靶基因;MTT结果显示,观察1组与观察2组Hep G2细胞OD值分别为0.446±0.034、0.472±0.028,与对照1组(0.649±0.041)和对照2组(0.610±0.023)相比,差异均有统计学意义(P均<0.05)。观察3组的OD值为0.606±0.016,与对照1组或对照2组相比,差异均无统计学意义;凋亡实验结果显示,观察1组与观察2组Hep G2细胞凋亡率分别为(29.13±2.04)%、(27.46±1.95)%,对照1组、对照2组分别为(8.76±0.53)%、(8.51±0.47)%,观察1组、观察2组与对照1组、对照2组比较,P均<0.05。观察3组的凋亡率为(9.47±0.61)%,与对照1组或对照2组相比,差异均无统计学意义。结论 miR-185可抑制人肝癌细胞增殖并诱导细胞凋亡;机制可能是通过下调PKM2表达实现。

关 键 词：肝癌 微小  RNA-185  M2 型丙酮酸激酶  细胞增殖 细胞凋亡  

分 类 号：R735.7]