文献类型：期刊文章

作　　者：杨亚萍[1] 汪亚帷[2] 李梦佳[2] 张可凡[2] 孙晓雪[2] 梁志红[1] 陈丽新[2] 王立伟[3] 杨海峰[4] 朱林燕[2]

YANG Ya-ping WANG Ya-wei LI Meng-jia ZHANG Ke-fan SUN Xiao-xue LIANG Zhi-hong CHEN Li-xin WANG Li-wei YANG Hai-feng ZHU Lin-yan(Analysis and Test Center,Jinan University Dept of Pharmacology,Medical College,Jinan University Dept of Physiology,Medical College,Jinan Universit 3.Dept of Pathology,Guangdong Hospital of Chinese Medicine Guangzhou 510120, Chin)

机构地区：[1]暨南大学分析测试中心,广东广州510120 [2]暨南大学医学院药理学系,广东广州510120 [3]暨南大学医学院生理学系,广东广州510632 [4]广东省中医院病理科,广东广州510120

出　　处：《中国药理学通报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No 31070997;81372382);广东省自然科学基金资助项目(No S2013010013780;2015A030313363);广东省医学科研基金项目(No A201506)

年　　份：2016

卷　　号：32

期　　号：9

起止页码：1208-1217

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2015_2016、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探测双硫仑(disulfiram,DSF)螯合氯化铜(DSF-Cu)通过影响线粒体功能和细胞骨架诱导人低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡。方法采用流式细胞术检测细胞周期、凋亡率、活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成以及线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)的改变。AFM探测细胞表面形貌和超微结构、细胞高度、宽度及粗糙度的变化。激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)观察细胞骨架F-actin的分布和重组。结果细胞周期检测显示DSF-Cu将CNE-2Z细胞周期阻滞于G2/M期。Annexin-V/PI检测细胞凋亡显示随药物浓度增加,与对照组相比,实验组早凋率和晚凋率、坏死率细胞均明显增加。进一步检测凋亡相关信号发现DSF-Cu可促进CNE-2Z细胞内活性氧水平的增加及诱导MMP下降。AFM成像表明,与对照组相比,随着药物浓度增大,细胞逐渐变小,胞质浓缩,高度增加,膜表面粗糙度降低,变得平整光滑;细胞伪足由对照组的丰富密集,逐渐变短、萎缩,甚至完全破坏。LSCM进一步观察发现DSF-Cu引起F-actin荧光强度减弱,结构重排,严重影响微丝的功能。结论 DSF-Cu可诱导CNE-2Z细胞依赖线粒体的凋亡途径,利用AFM在单细胞水平上分析DSF-Cu对细胞膜的毒性作用,为鼻咽癌的治疗提供新的思路。

关 键 词：双硫仑 原子力显微镜  细胞骨架 活性氧  凋亡 鼻咽癌 线粒体膜电位

分 类 号：R329.24] R329.25[基础医学类]