文献类型：期刊文章

作　　者：阮中宝[1] 傅行礼[2] 李伟[1] 叶军[3] 王如珠[1] 殷屹岗[1] 朱莉[1]

机构地区：[1]泰州市人民医院心内科,225300 [2]江苏大学医学部 [3]泰州市人民医院临床医学中心实验室,225300

出　　处：《中华心血管病杂志》

基　　金：泰州市社会发展项目（TS2013006）

年　　份：2016

卷　　号：44

期　　号：9

起止页码：786-792

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2015_2016、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的 探讨靶向沉默Notch 1、2和3基因对动脉粥样硬化患者巨噬细胞内Notch信号通路关键基因Delta-like 4（DLL4）、Jagged 1和核因子-κB （NF-κB）信号通路关键基因IκBα、p52表达的影响,从基因层面研究防治动脉粥样硬化的方法.方法 采集冠状动脉粥样硬化患者静脉血后体外分离单核细胞,并诱导转化为巨噬细胞.将巨噬细胞分为5组：空白对照组（未转染siRNA）、阴性对照组（转染NC-siRNA）、Notch1-siRNA组（转染Notch1-siRNA）、Notch2-siRNA组（转染Notch2-siRNA）和Notch3-siRNA组（转染Notch3-siRNA）.分别采用RT-PCR和Western blot法检测各组DLL4、Jagged 1、IκBα和p52的mRNA和蛋白相对表达水平,采用电泳迁移率变动分析（EMSA）检测各组NF-κB活性,采用免疫荧光法检测各组巨噬细胞内p52的分布.结果 （1）RT-PCR和Westernblot检测显示,Notch1-siRNA组、Notch2-siRNA组和Notch3-siRNA组DLL4、Jagged 1和p52的mRNA和蛋白相对表达水平均低于空白对照组和阴性对照组,而IκBα的mRNA和蛋白相对表达水平均高于空白对照组和阴性对照组（P＜0.05或0.01）;Notch1-siRNA组DLL4、Jagged 1和p52的mRNA和蛋白相对表达水平均低于Notch2-siRNA组和Notch3-siRNA组,IκBα的mRNA和蛋白相对表达水平均高于Notch2-siRNA组和Notch3-siRNA组（P＜ 0.05或0.01）;空白对照组和阴性对照组DLL4、Jagged 1、IκBα和p52的mRNA和蛋白相对表达水平差异均无统计学意义（P均＞0.05）.（2）EMSA检测提示,Notch1-siRNA组（613±57）、Notch2-siRNA组（1 169±85）和Notch3-siRNA组（1 454±90）的NF-κB活性均低于空白对照组（2 642±115）和阴性对照组（2 407±100）（P均＜0.01）;Notch1-siRNA组的NF-κB活性低于Notch2-siRNA组和Notch3-siRNA组,Notch2-siRNA组的NF-κB活性低于Notch3-siRNA组（P均＜0.01）;空白对照组和阴性对照组的NF-κB活性差异无统计学意义（P＞0.05）.（3）巨噬细胞核内和胞浆内NF-κB/p52蛋白的总荧光�

关 键 词：动脉粥样硬化 巨噬细胞 NF-κB  RNA干扰  

分 类 号：R543.5]