文献类型：期刊文章

作　　者：单长见[1,2] 张竞[1] 尹洋[1] 吕晓玲[1] 李姿[1] 兰云刚[1] 贺文琦[1] 高丰[1]

机构地区：[1]吉林大学动物医学学院,吉林长春130062 [2]天津市动物卫生监督所,天津300210

出　　处：《中国兽医学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31272530);国家重点研发计划资助项目(2016YFD0500707);吉林省青年科研基金资助项目(20160520033JH)

年　　份：2016

卷　　号：36

期　　号：11

起止页码：1813-1817

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2015_2016、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为建立检测猪血凝性脑脊髓炎病毒(porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus,PHEV)血清抗体的间接ELISA方法,构建了高效表达PHEV核衣壳蛋白(N)的重组质粒(pET28a-N),Western blot检测该重组蛋白具有较好的免疫原性。以纯化的N重组蛋白作为包被抗原,通过方阵试验确定了抗原的最适包被浓度为2mg/L,酶标二抗的最佳稀释倍数为1∶10 000,建立了用于PHEV抗体检测间接ELISA方法。此外,用该法(N-ELISA)对天津市地区采集到的200份猪血清样品进行检测,阳性检出率为83.5%,与前期工作中建立的全病毒作为包被抗原的间接ELISA诊断方法 (HEV-ELISA)检测结果的符合率为90.91%。结果表明:以重组N蛋白为包被抗原所建立的用于PHEV血清抗体检测的方法能够用于检测PHEV感染及相关的流行病学调查。

关 键 词：猪血凝性脑脊髓炎病毒 重组N蛋白 间接ELISA 血清抗体

分 类 号：S852.65]