文献类型：期刊文章

作　　者：李素娟[1,2] 袁文常[3] 麦云珮[1,2] 侯宁[1,2]

机构地区：[1]广州医科大学药学院药理学教研室,广东省广州市511436 [2]广州心血管疾病研究所,广东省广州市510260 [3]解放军兰州军区乌鲁木齐总医院检验科,新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830000

出　　处：《中国组织工程研究》

基　　金：国家自然科学基金项目(81402928);广东省医学科研基金项目(B2012167);广州市教育科研计划项目(2012C199)~~

年　　份：2016

卷　　号：20

期　　号：40

起止页码：6021-6027

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、CSA-PROQEUST、EMBASE、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：背景:Brahma-相关基因1是调节染色质重构的重要核蛋白,在糖尿病心肌病中表达降低。目的:构建大鼠Brahma-相关基因1重组腺病毒载体,评价其在氧化应激诱导原代心肌细胞凋亡中的保护作用。方法:构建Brahma-相关基因1重组腺病毒载体质粒,经人胚肾293T细胞包装、扩增、计算滴度后,将Brahma-相关基因1重组腺病毒转染入SD乳鼠原代培养心肌细胞,以空载体EGFP转染细胞及正常细胞作为对照,24 h后,荧光显微镜观察转染效率;荧光定量PCR、免疫印迹法检测细胞Brahma-相关基因1mR NA、蛋白表达;24 h后,分别加入100μmol/L H2O2处理12 h,免疫印迹法检测Brahma-相关基因1蛋白表达、凋亡标志物cleaved-Caspase3表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果与结论:(1)构建的重组腺病毒成功转染至心肌细胞,转染效率达90%以上,被转染细胞的Brahma-相关基因1 mR NA、蛋白表达明显增高;(2)H2O2可显著抑制心肌细胞Brahma-相关基因1表达,诱导心肌细胞凋亡,刺激心肌细胞cleaved-Caspase3表达;Brahma-相关基因1重组腺病毒可减轻由H2O2导致的上述心肌细胞损伤;(3)结果表明,氧化应激能直接抑制心肌细胞Brahma-相关基因1表达,Brahma-相关基因1在氧化应激诱导的心肌细胞凋亡中发挥保护作用。

关 键 词：基因 细胞 糖尿病心肌病 组织工程  实验动物  心血管及肺损伤与修复动物模型  Brahma-相关基因1  腺病毒载体 氧化应激 心肌细胞 转染  基因治疗  国家自然科学基金  

分 类 号：R318[生物医学工程类]