文献类型：期刊文章

作　　者：郝豆豆[1] 雷鸣[1] 武俊喜[2] 拉多[1] 张勇群[3]

机构地区：[1]西藏大学,西藏拉萨850000 [2]中国科学院地理科学与资源研究所,西藏拉萨850000 [3]西藏自治区人民政府成都办事处医院,四川成都610000

出　　处：《时珍国医国药》

基　　金：湖南师范大学蛋白质与发育生物学教育部重点实验室(2014年)开放课题(No.2015DF03);西藏自治区科技厅自然科学基金项目(No.2015ZR-13-5)

年　　份：2016

卷　　号：27

期　　号：8

起止页码：2034-2037

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD_E2015_2016、JST、RCCSE、核心刊

摘　　要：目的比较不同研磨方式、不同提取方法提取的拉萨蒲公英叶片基因组DNA的效果。方法分别用液氮和提取缓冲液两种研磨方式对拉萨蒲公英叶片进行研磨处理,用5种方法提取拉萨蒲公英叶片基因组DNA,分别用紫外分光光度计法、琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增检测DNA的质量。结果用提取液研磨可以充分除去色素、酚类、蛋白质等物质,提取的DNA纯度高,降解少,用液氮研磨提取的DNA杂质多,降解严重;高盐低p H法提取的DNA的A260/A280接近1.8,A260/A230为1.93,Ezup柱式试剂盒法提取的DNA的A260/A280为2.01,A260/A230大于2.0,说明这两种方法提取的DNA的纯度比较高,其余3种方法提取的DNA的纯度都比较低。结论用提取缓冲液研磨提取的DNA的质量高于液氮研磨,并且缓冲液研磨能降低DNA提取成本,操作安全,因此是一种经济适用的方法;Ezup柱式试剂盒法操纵简单,但是价格昂贵,且DNA的得率低,高盐低p H法成本低,但是提取时间比试剂盒长,两种方法提取的DNA的PCR效果相差不大,高盐低p H法适用于需要大批量提取拉萨蒲公英叶片DNA的研究。

关 键 词：拉萨蒲公英  研磨方法  提取方法  PCR扩增

分 类 号：R284.2[中药学类]