文献类型：期刊文章

作　　者：徐平丽[1] 唐桂英[1] 付春[2] 刘玮[1,3] 鲁成凯[2] 姜言生[2] 刘皓[2] 单雷[1,3]

机构地区：[1]山东省农业科学院生物技术研究中心/山东省作物遗传改良与生理生态重点实验室,济南250100 [2]山东省潍坊市农业科学院,潍坊261031 [3]山东大学农学院,济南250100

出　　处：《农业生物技术学报》

基　　金：国家自然科学基金(No.31201272);山东省农业良种工程(No.2014-2016);玛氏集团巧克力事业部全球花生可持续发展计划

年　　份：2016

卷　　号：24

期　　号：9

起止页码：1364-1373

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2015_2016、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：花生(Arachis hypogaea)Δ12脂肪酸去饱和酶基因(Δ12fatty acid desaturase,Ah FAD2A和Ah FAD2B)是决定花生籽粒油酸含量和高油酸亚油酸比值(oleic acid/linoleic acid,O/L)的关键基因,高油酸花生品种中这2个基因均发生突变。针对普通油酸花生和高油酸花生Ah FAD2A 448位G/A差异和Ah FAD2B 442位A碱基的插入/缺失(insertion-deletion,In Dels)等位差异,已开发了包括酶切扩增多态性序列法(cleaved amplified polymorphic sequence,CAPS)和等位基因特异PCR(allele-specific PCR,AS-PCR)等多种检测的标记和检测方法。本研究针对上述2个SNP位点,开发了可进行高通量检测的实时定量PCR引物、Taq Man探针和检测技术,该方法检测效率和准确率均很高。本研究还开发了更为经济和高效的竞争性等位基因特异性PCR(kompetitive allele specific PCR,KASP)引物和检测方法。利用开发的Taq Man探针检测方法和KASP方法检测了14个花生品种和高油酸选育回交组合BC2F1和BC1F2群体部分种子的基因型,并比较了两种方法检测结果的一致率,发现这两种方法检测Ah FAD2B 442 nt A/-In Del差异结果的一致率高达96.7%;而针对Ah FAD2A 448位G/A差异位点检测一致率仅为71.7%。本研究还比较了目前常用的CAPS、AS-PCR、测序法、Taq Man探针法及KASP方法的优缺点,对相关方法的应用前景进行了讨论。本研究涉及的高通量检测方法可有效地辅助高油酸品种的选育,极大地提高了目标性状选择的准确性和效率。

关 键 词：花生12脂肪酸去饱和酶基因(AhFAD2)  等位变异 油酸 检测方法  花生

分 类 号：S336]