文献类型：期刊文章

作　　者：方安然[1] 牛丹丹[1,2] 乔舰[1] 吴海洋[1] 董自星[3] 路福平[1]

机构地区：[1]天津科技大学生物工程学院,天津300457 [2]福州大学生物科学与工程学院,福建福州350116 [3]天津科技大学化工与材料学院生物化工系,天津300457

出　　处：《食品与发酵工业》

基　　金：天津市应用基础与前沿技术研究计划(青年基金项目)(14JCQNJC09200);天津市高等学校科技发展基金计划项目(20130628);福建省教育厅产学研(JA15049)

年　　份：2016

卷　　号：42

期　　号：7

起止页码：23-29

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSCD、CSCD2015_2016、FSTA、JST、RCCSE、RSC、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：淀粉酶法制备高麦芽糖浆工艺中，淀粉液化酶、脱支酶以及β-淀粉酶不可或缺，其中脱支酶是决定淀粉转化为麦芽糖的转化率高低的关键因素。在工业上常用的两种脱支酶中，异淀粉酶比普鲁兰酶能更好地协助β-淀粉酶水解淀粉生成麦芽糖。首先通过PCR扩增获得异淀粉酶的编码基因iso并克隆入表达载体pHY—WZX，在枯草芽胞杆菌1A717中获得重组质粒pHY—ISO，将构建好的重组质粒电转化入地衣芽孢杆菌D402中，其摇瓶发酵酶活力达330U／mL，实现了异淀粉酶的异源高效表达。基本酶学特征分析表明：该重组酶适宜反应条件为50～55℃，pH6．5～9．0；K＋、Ca2＋、Mg2＋对酶活有促进作用，其他离子或化合物强烈抑制酶活。HPLC分析表明，该重组异淀粉酶与普鲁兰酶相比，更有助于极高麦芽糖浆的制备。最后通过在线软件对该酶进行同源结构模拟和分析，进一步确定其为异淀粉酶，为后续对其进行分子改造奠定了基础。

关 键 词：异淀粉酶 地衣芽胞杆菌  高效表达  麦芽糖浆生产  同源结构模拟  

分 类 号：TS231]