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期刊文章详细信息

非洲猪瘟病毒RPA等温检测方法的建立    

Rapid and Sensitive Detection of African Swine Fever Virus by Recombinase Polymerase Amplification

  

文献类型:期刊文章

作  者:王建昌[1] 王金凤[1] 刘立兵[1] 孙晓霞[1] 袁万哲[2]

机构地区:[1]河北出入境检验检疫局技术中心,河北石家庄050051 [2]河北农业大学动物医学院,河北保定071001

出  处:《中国动物检疫》

年  份:2016

卷  号:33

期  号:7

起止页码:78-81

语  种:中文

收录情况:CAB、CAS、RCCSE、普通刊

摘  要:为建立一种简单、快速的非洲猪瘟病毒(ASFV)分子检测方法,基于ASFV P72基因保守序列,设计并合成引物,建立了一种ASFV重组酶聚合酶扩增(RPA)等温检测方法。结果表明,所建立的RPA方法在38℃水浴锅中恒温反应30 min,即可实现对目的片段的有效扩增;以包含ASFV P72基因的ORF质粒为模板,RPA的检测限达到10~2 copies,同世界动物卫生组织(OIE)推荐的实时荧光PCR方法检测限一致,但比OIE推荐方法的检测限高10倍;RPA仅特异性扩增ASFV P72基因,对FMDV、CSFV、PRRSV、PRV和PCV-2基因组c DNA或DNA没有扩增。本研究所建立的RPA方法操作简单、反应快速、检测成本低、结果确实可靠,为非洲猪瘟的一线防控提供了一种新的、可靠的技术支持。

关 键 词:非洲猪瘟病毒 分子检测 等温扩增  聚合酶重组酶扩增  快速  

分 类 号:S852.651]

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