期刊文章详细信息
应用RP-HPLC法检测重组猪干扰素α成品蛋白含量
Application of RP-HPLC assay to detect the protein content of finished products of recombinant porcine interferon α
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]安徽医科大学,合肥230032 [2]安徽九川生物科技有限公司,芜湖241000
基 金:国家星火计划(2013GA710060;2014GA710014)资助项目;安徽高校省级自然科学研究重大项目(KJ2012ZD08)
年 份:2016
卷 号:25
期 号:13
起止页码:1471-1474
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD_E2015_2016、EMBASE、IC、IPA、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的:建立测定重组猪干扰素α成品中蛋白含量的反相高效液相色谱法(RP-HPLC),并进行验证。方法:应用RP-HPLC法测定重组猪干扰素α标准品及供试品的蛋白含量,并对方法的线性、精密度、稳定性、重复性进行验证。采用已建立的RP-HPLC检测方法测定7批重组猪干扰素α样品的蛋白含量,与Lowry法的检测结果进行比较。结果:重组猪干扰素α在6.141 7-25μg范围内,与峰面积呈现良好的线性关系(R2=0.985 9)。用所建立的方法测定同一标准品,进样6次,计算得到RSD(相对标准偏差)为1.7%;同一批样品进样12次,检测供试品的干扰素α蛋白含量,计算得到RSD为3.9%;同一批样品,取6份分别进样,检测供试品的干扰素α蛋白含量,计算得到RSD为0.9%。结论:建立了用RP-HPLC法测定重组猪干扰素α蛋白含量的方法。该方法简便、精密度、稳定性、重复性好,将蛋白分离成单一组分峰,紫外定量测定各峰吸光度,集定量与定性、纯度检验合一,定量范围可小于10μg,测定体积只需几微升,可用于重组猪干扰素α成品蛋白含量检测。
关 键 词:重组猪干扰素α 反相高效液相色谱法 Lowry法 蛋白含量 相对标准偏差
分 类 号:R978.7]
参考文献:
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