文献类型：期刊文章

作　　者：卢桂义[1] 邬敏辰[2] 黄卫宁[1] 张峦[3] 李宁[3] Courtin Christopher[3]

机构地区：[1]食品科学与技术国家重点实验室江南大学,江苏无锡214122 [2]江南大学无锡医学院,江苏无锡214122 [3]南京百合贝可生物科技有限公司,江苏南京210000

出　　处：《食品与生物技术学报》

基　　金：国家863计划项目(2012AA022207C);江苏省产学研联合创新基金--前瞻性联合研究项目(BY2014023-16);国家自然科学基金项目(31071595;20576046);张家港市科技支撑计划项目(ZKN1301);江苏省科技支撑计划项目(BE2012310;BE2011380);苏州市科技支撑计划项目(SNG201401)

年　　份：2016

卷　　号：35

期　　号：5

起止页码：492-497

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD2015_2016、FSTA、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：将优化后的来自嗜热裂孢菌的木聚糖酶基因在毕赤酵母中进行异源表达并分析了其表达产物的酶学性质。对来源于嗜热裂孢菌的木聚糖酶基因催化域进行密码子优化,人工合成优化后的木聚糖酶成熟肽基因xyl11~M,构建重组表达质粒pPIC9K-xyl11~M,将其经SalⅠ线性化后电击转化毕赤酵母GS115,经G418筛选得到重组工程菌GS115/xyl11~M,甲醇诱导表达重组蛋白。表达的重组蛋白reXyl11M经SDS-PAGE分析,其相对分子质量约34 000,酶活性可达到105.3 U/m L,最适反应温度为70℃,并在30~75℃温度内较稳定;最适反应pH为6.0,在pH6.5~7.5范围内稳定;Co^(2+)、Ba^(2+)、Cu^(2+)、Li^+对酶活性有强烈的激活作用,Fe^(3+)有明显的抑制作用,其它金属离子及EDTA对re Xyl11M酶活性影响不大。结果表明xyl11M成功在毕赤酵母GS115中实现表达,且reXyl11~M的酶学特性优良。

关 键 词：耐热木聚糖酶 毕赤酵母 合成基因 基因表达  酶学性质

分 类 号：Q78]