文献类型：期刊文章

作　　者：牛文博[1] 王穗海[1] 李鹏[1] 王明清[2] 高彦君[1] 董宁宁[1] 何沛嵘[1] 石相宜[1] 李纪良[1]

机构地区：[1]南方医科大学生物技术学院抗体工程研究所,广东广州510515 [2]南方医科大学中医药学院,广东广州510515

出　　处：《肿瘤》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号:81201663;81171959)~~

年　　份：2016

卷　　号：36

期　　号：6

起止页码：621-627

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2015_2016、DOAJ、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的 :研究沉默环指蛋白181(ring finger protein 181,RNF181)基因表达对结肠癌细胞SW480生长的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 :采用慢病毒感染的方法将靶向沉默RNF181基因表达的重组慢病毒颗粒LV3-RNF181-KD转入人结肠癌SW480细胞中[以感染重组慢病毒颗粒LV3-negative control(NC)为阴性对照)]。病毒感染48 h后,分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测SW480细胞中RNF181m RNA及蛋白的表达水平;CCK-8法和平板克隆法检测RNF 181基因沉默对SW480细胞增殖的影响;蛋白质印迹法检测对细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)及其磷酸化ERK(phospho-ERK,p-ERK)表达的影响。结果 :实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测结果显示,重组慢病毒颗粒LV3-RNF181-KD转入SW480细胞后,细胞中RNF181 m RNA和蛋白的表达水平均较阴性对照组(感染重组慢病毒颗粒LV3-NC的SW480细胞)明显下调,差异均有统计学意义(P值均<0.01)。CCK-8及平板克隆实验证实,沉默RNF181基因表达后SW480细胞的增殖能力明显增强(P值均<0.01)。细胞中ERK蛋白的表达水平无明显变化(P>0.05),而p-ERK蛋白的表达水平明显升高(P<0.01)。结论 :沉默RNF181基因的表达可增强人结肠癌细胞SW480的增殖能力,其机制可能与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activate protein kinase,MAPK)/ERK信号转导通路的活化有关。

关 键 词：结肠肿瘤 慢病毒感染 RNF181基因  细胞增殖

分 类 号：R735.35]