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水产品中霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌多重PCR检测方法的建立
DEVELOPMENT OF A MULTIPLEX POLYMERASE CHAIN REACTION ASSAY FOR SIMULTANEOUS DETECTION OF VIBRIO PARAHAEMOLYTICUS, VIBRIO CHOLERAE AND VIBRIO VULNIFICUS IN AQUATIC FOODS
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241 [2]洛阳师范学院生命科学学院,洛阳471022
基 金:上海市科学技术委员会科研计划项目(13DZ0502702);公益性行业(农业)科研专项(201303045)
年 份:2016
卷 号:24
期 号:1
起止页码:44-51
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2014、CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌是引起全球范围的食源性疾病的重要病原菌,建立一种能准确鉴别这3种弧菌的方法具有重要意义。groEL基因是包括弧菌属在内的多种细菌检测的分子标记。本研究根据3种弧菌的groEL基因分别设计引物,经PCR扩增及反应条件的优化,建立一种能同时检测这3种弧菌的多重PCR方法。结果表明应用多重PCR技术对霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌能分别特异性地扩增出418、644、192 bp的目的片段。检测其他非目标供试菌时,不出现任何扩增条带。敏感性检测结果表明,对霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌最低检测限分别为102、102、103CFU/m L。人工染菌水产品检测结果显示,所建立的多重PCR方法能够有效检测出目的细菌,而未染菌组均为阴性。本文通过建立的多重PCR方法实现了对这3种弧菌的同时检测,具有快速、灵敏度高和特异性强等优点,对水产品中这3种弧菌的检测和流行病学调查具有重要意义。
关 键 词:霍乱弧菌 副溶血弧菌 创伤弧菌 groEL基因 多重PCR
分 类 号:S852.612]
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