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双抗体夹心ELISA检测牛肠道病毒抗原方法的建立及流行病学调查
Development of a direct sandwich ELISA for detection of BEV antigen and BEV epidemiological investigation in Jilin province
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]吉林大学动物医学学院,吉林长春130062 [2]吉林大学人兽共患病研究所,吉林长春130062
基 金:国家自然科学基金资助项目(31572531);吉林省科技重点攻关项目(20140204064NY)
年 份:2016
卷 号:36
期 号:4
起止页码:567-571
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2015_2016、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:应用大肠杆菌表达纯化的E种肠道病毒HY12 VP1和VP2重组蛋白制备的抗体,建立了检测牛肠道病毒病原的双抗体夹心ELISA方法,并对吉林省不同地区的牛群感染BEV进行了病原流行病学调查。结果,应用方阵法确定的抗VP1鼠源Ig G作为捕获抗体的最佳包被量为0.75 g/100 L,酶标抗体的最佳稀释度为1∶3 600。对大量阴性粪便样品进行了检测及其统计学处理,确定了双抗体夹心ELISA检测BEV的判定标准,样品D_(490)值≥0.143判定为阳性。特异性、敏感性等试验结果表明,所建立的检测BEV抗原方法具有特异、敏感和快速等特点。与RT-PCR方法相比,该方法操作简单快速,易在基层推广应用。对吉林省不同地区牛群粪便样品进行了检测,发现不同地区牛群的BEV感染率为8.16%~58.7%。本研究首次建立了检测BEV的双抗体夹心ELISA方法,为BEV感染的诊断、流行病学调查及本病防治提供了方法和理论依据。
关 键 词:牛肠道病毒 BEV HY12 VP1 VP2 双抗体夹心ELISA 流行病学调查
分 类 号:S852.63]
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