文献类型：期刊文章

作　　者：贾雅菁[1] 付博宇[1] 王羽[1] 马晓燕[1] 张先舟[1] 苑宁[2] 张伟[1]

机构地区：[1]河北农业大学食品科技学院,河北保定071000 [2]河北农业大学理工学院,河北沧州061100

出　　处：《食品科学》

基　　金：河北省自然科学基金项目(C2008000216)

年　　份：2016

卷　　号：37

期　　号：6

起止页码：184-189

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD_E2015_2016、EI(收录号：20162402498118)、FSTA、IC、JST、RCCSE、RSC、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：建立牛乳中蜡样芽孢杆菌便捷可靠的检测方法,根据已公布的蜡样芽孢杆菌hbl A基因序列设计内外引物,并向反应体系中加入荧光染料SYBRGreenⅠ,利用实时荧光监测仪,建立实时荧光环介导等温扩增技术(real-time fluorescence loop-mediated isothermal amplification,Real Amp)检测蜡样芽孢杆菌的方法,扩增产物经电泳和酶切鉴定。通过21株致病菌验证RealAmp特异性,并比较了Real Amp与普通环介导等温扩增技术的敏感性,对人工污染的检出限进行了测定。结果表明对21 株致病菌进行特异性实验,4株蜡样芽胞杆菌呈阳性结果,17株非蜡样芽胞杆菌均呈阴性结果。RealAmp检测纯菌的灵敏度为8.2 CFU/m L,比普通环介导等温扩增技术的灵敏度高10倍,人工污染牛乳RealAmp的检出限为8.2 CFU/m L。并且在20 min左右即可判定结果。该方法快速、准确、灵敏度高、操作便捷、可实时监控检测蜡样芽孢杆菌,有望成为快速检测蜡样芽孢杆菌的有效方法。

关 键 词：实时荧光环介导等温扩增检测技术  蜡样芽胞杆菌 检测  牛乳

分 类 号：TS207.4]