文献类型：期刊文章

作　　者：祁军[1] 詹曦菁[1] 李智慧[1] 左锋[1] 王馨[1] 柴宏森[1] 刘振宇[1]

机构地区：[1]天津国际旅行卫生保健中心,天津300456

出　　处：《口岸卫生控制》

基　　金：国家质检总局科技计划项目(2010IK221)

年　　份：2016

卷　　号：21

期　　号：1

起止页码：11-16

语　　种：中文

收录情况：普通刊

摘　　要：目的建立一种快速、敏感、特异的肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7的交叉引物等温扩增(Cross Priming Amplification,CPA)检测方法。方法根据EHEC O157:H7 stx1基因特征性保守序列(Gen Bank83460),设计交叉引物、剥离引物和检测探针,建立了EHEC O157:H7的CPA检测技术。用该方法检测19株细菌常见的食源性细菌,以验证其特异性;并用菌液浓度梯度稀释的方法对该方法的检测灵敏度进行评价。并通过60份食品模拟样品验证其在实际应用中的可性行,该检测结果与经典的细菌分离培养鉴定方法及常用的荧光定量PCR法进行比较。结果在检测的19株细菌中,只有EHEC O157:H7菌株的检测结果为阳性。其它菌株检测结果均为阴性,证明其特异性良好;通过浓度梯度稀释证明该方法检测的灵敏度可达l02cfu/m L;与分离培养鉴定法及荧光定量PCR法比较,其检测的灵敏度均为96.77%和96.67%、特异度分别为93.10%和90%、准确性分别为95%和93.33%。结论用于EHEC O157:H7的CPA检测体系具有简便、快速、灵敏、特异的优点,可用于进出境口岸现场及食品EHEC O157:H7的快速检测。

关 键 词：交叉引物等温扩增  CPA 肠出血性大肠杆菌O157:H7 EHEC O157:H7

分 类 号：R378.2]