文献类型：期刊文章

作　　者：宗宪磊[1] 陆海滨[1] 祁佐良[1] 李国菊[2] 宋国栋[1] 都乐[1] 靳小雷[1] 姜笃银[3]

机构地区：[1]中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院,北京市100144 [2]山东大学口腔医学院放射科,山东省济南市250014 [3]山东大学第二医院美容整形烧伤外科、急诊科,山东大学组织工程研究所,山东省济南市250033

出　　处：《组织工程与重建外科杂志》

基　　金：国家自然科学基金项目(30670571,81201467);山东省自然科学基金项目(ZR2011HM027)

年　　份：2016

卷　　号：12

期　　号：1

起止页码：1-5

语　　种：中文

收录情况：JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的应用噬菌体随机7肽库筛选角质细胞生长因子(Keratinocyte growth factor,KGF)的关键序列,进行KGF活性短肽的调整和合成,并研究其对表皮细胞增殖的作用。方法以KGF单克隆抗体为靶,筛选噬菌体随机7肽库,获得KGF的特异性序列,并进行序列调整。用免疫荧光法检测KGF活性短肽的表皮细胞亲和力。用CCK-8法检测KGF活性短肽对表皮细胞增殖的影响。用RT-PCR法和Western-blot法检测表皮细胞上特异性受体KGFR的表达水平。结果筛选噬菌体随机7肽库,获得2个与KGF相似的特异性序列,合成获得2个KGF活性短肽,并纯化至98%纯度,短肽的C端进行氨基化封闭,N端进行罗丹明激光染料标记。免疫荧光检测结果显示,2个KGF活性短肽均能够与表皮细胞相结合。CCK-8检测结果显示,与阴性对照组相比,2个KGF活性短肽能够促进表皮细胞增殖,并呈浓度依赖性。RT-PCR和Western-blot检测结果显示,2个KGF活性短肽组中表皮细胞表达KGFR增强。结论从噬菌体随机7肽库中筛选到2个KGF的关键序列,合成的2个KGF活性短肽能够与KGFR相结合,并增强KGFR的表达,从而促进表皮细胞增殖,有望应用于促进创面愈合。

关 键 词：噬菌体随机7肽库  角质细胞生长因子 活性短肽  表皮细胞 创面愈合

分 类 号：R752.53]