文献类型：期刊文章

作　　者：左华楚[1,2] 李秀霞[1,2] 李时荣[1,2] 云芬[1,2] 徐晓艳[1,2]

机构地区：[1]内蒙古医科大学基础医学院病理学教研室,内蒙古呼和浩特010059 [2]内蒙古医科大学附属医院病理科,内蒙古呼和浩特010059

出　　处：《中华肿瘤防治杂志》

基　　金：国家自然科学基金(81201854);内蒙古医科大学博士启动基金(bsjj201304);内蒙古自然科学基金(2014MS0858)

年　　份：2015

卷　　号：22

期　　号：24

起止页码：1865-1873

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2014、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、EMBASE、IC、RCCSE、SCOPUS、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的 LASS2/TMSG-1是近年来新发现的一种肿瘤转移抑制基因本实验主要研究沉默LASS2/TMSG-1基因对人肺癌细胞系低转移潜能亚系95C细胞的体外侵袭迁移能力的影响,初步探讨LASS2/TMSG-1基因的作用机制。方法采用蛋白质印迹法检测LASS2/TMSG-1在人不同转移潜能人肺癌细胞系95C(低转移潜能)和95D(高转移潜能)细胞中的表达情况。运用脂质体转染法将靶向沉默LASS2/TMSG-1基因的Psilencer2.1-U6/TMSG-1shRNA转染95C细胞(低转移潜能,LASS2/TMSG-1高表达),实验分为空白对照组(Normal)、无关阴性对照组(Control)及LASS2/TMSG-1基因沉默组(Silence)三组。应用体外侵袭实验、迁移实验检测细胞侵袭与迁移能力的变化;利用蛋白质印迹法检测LASS2/TMSG-1、ATP6L、MMP-2、MMP-9及Bcl-2在细胞中的表达水平及MMP-2的活性;使用比色法检测细胞中V-ATPase的活性;使用BCECF-AM与BCECF氢离子敏感探针检测细胞内外氢离子浓度的变化。结果 LASS2/TMSG-1在95C细胞系中的蛋白表达量(1.09±0.46)明显高于在95D细胞系中的表达(0.53±0.25),差异有统计学意义,z=1.925,P<0.05。转染LASS2/TMSG-1shRNA 48h后,Silence组LASS2/TMSG-1 mRNA表达量为0.76±0.03,Control组为1.56±0.10,Normal组为1.66±0.42,差异有统计学意义,H=10.56,P<0.05;Silence组LASS2/TMSG-1蛋白表达量为0.56±0.09,Control组为1.57±0.08,Normal组为1.66±0.08,差异有统计学意义,H=14.84,P<0.05。质粒瞬时转染48h后,体外侵袭实验显示,Silence组穿膜细胞数为50.67±6.74,Control组为25.33±10.21,Normal组为27.17±6.40,差异有统计学意义,H=11.39,P<0.05;体外迁移实验显示,Silence组穿膜细胞数为98.50±10.70,Control组为26.50±4.87,Normal组为30.25±7.81,差异有统计学意义,H=15.89,P<0.05。与Normal组及Control组相比,沉默组细胞V-ATPase的C亚基ATP6L的mRNA(z=2.31,P<0.05;z=2.46,P<0.05)及蛋白表达(z=2.62,P<0.05;z=2.61,P<0.05)升高,V-ATPase的活性(z=3.13,P<0.05;z=3.14,P<0.05)和细胞外氢离子浓度(P�

关 键 词：LASS2/TMSG-1  V-ATPASE 基质金属蛋白酶 BCL-2 侵袭迁移  

分 类 号：R734.2]