文献类型：期刊文章

作　　者：蒋再学[1] 王芳[1] 田新贵[1] 朱蔚云[2] 苏晓波[1]

机构地区：[1]广州医科大学基础学院医学遗传学与细胞生物学教研室,广东广州511436 [2]广州医科大学基础学院生物学实验中心,广东广州511436

出　　处：《热带医学杂志》

基　　金：国家自然科学基金青年科学基金(31200132);广东省自然科学基金(S2013040015594);广东高校优秀青年创新人才培养计划项目(育苗工程2013LYM0072)

年　　份：2016

卷　　号：16

期　　号：1

起止页码：22-24

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、RCCSE、UPD、WOS、ZGKJHX、ZR、普通刊

摘　　要：目的克隆表达人3型腺病毒（HAdV-3）的纤毛蛋白纤突片段（knob）,分析其免疫原性,为腺病毒临床诊断试剂及新型疫苗的研发奠定基础。方法 PCR扩增knob基因片段,克隆到表达载体pGEX-4T-3中进行诱导表达,SDSPAGE电泳分析表达产物,包涵体溶解复性后亲和层析纯化融合蛋白,Western blot鉴定,纯化的蛋白免疫小鼠制备抗血清,间接ELISA法检测小鼠血清的效价,Western blot鉴定抗血清特异性。结果成功构建了重组原核表达质粒pGEX-Ad3 knob,其在大肠杆菌中高效表达并纯化重组knob融合蛋白,融合蛋白免疫小鼠抗血清效价高达10~7,Western Blot证实此抗血清可识别人3型腺病毒纤维蛋白。结论成功获得了重组HAdV-3 knob蛋白,其具有强免疫原性,可以作为研发人3型腺病毒入侵机制研究、诊断试剂及疫苗研发的原料。

关 键 词：人3型腺病毒  纤毛蛋白  纤突  重组表达  多克隆抗体

分 类 号：R511.8]