文献类型：期刊文章

作　　者：杨智景[1] 李长红[1] 张浩[1] 苗亮[1] 陈炯[1]

机构地区：[1]宁波大学海洋学院生物化学与分子生物学实验室,宁波315211

出　　处：《海洋与湖沼》

基　　金：国家自然科学基金项目;31372555号;浙江省自然科学基金项目;LZ13C190001号;高等学校博士学科点专项科研基金;20133305120008号

年　　份：2015

卷　　号：46

期　　号：6

起止页码：1380-1389

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2015_2016、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)是TNF超家族成员之一,在动物机体抵抗细菌和病毒入侵时发挥重要作用。本研究基于香鱼(Plecoglossus altivelis)单核/巨噬细胞转录组数据库,获得了香鱼TNF-α基因(Pa TNF-α)全长c DNA序列。Pa TNF-α由1932个核苷酸组成,包含一个大的开放阅读框,编码235个氨基酸,预测分子量为26.4 k Da。氨基酸序列多重比对分析表明,Pa TNF-α具有TNF超家族的特征序列、1个TACE酶切位点和1个保守的二硫键,与虹鳟(Oncorhynchus mykiss)TNF-α同源性最高,为53.4%;系统进化树分析表明,鱼类TNF-α形成一个大簇,Pa TNF-α与虹鳟TNF-α进化相关性最高。实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)结果显示,Pa TNF-αm RNA在头肾中表达量最高;鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染后香鱼肝、脾、头肾和外周血细胞中Pa TNF-αm RNA表达量显著上调;香鱼单核/巨噬细胞经鳗弧菌、LPS和poly(I:C)处理后,Pa TNF-αm RNA表达量显著上调。原核表达了Pa TNF-α成熟肽,并制备了抗血清。Western blot分析表明,鳗弧菌感染后香鱼血清和单核/巨噬细胞上清中的Pa TNF-α表达量含量也显著增加。综上,香鱼TNF-αm RNA及蛋白的表达与病原体感染密切相关,为深入研究鱼类TNF-α的生物学功能及其在病原体感染中的作用机制提供理论基础。

关 键 词：TNF-Α 香鱼 鳗弧菌 单核/巨噬细胞  表达  

分 类 号：Q786] S917[水产类]