文献类型：期刊文章

作　　者：冯仲锴[1] 孙永强[1] 刘汝银[1] 岳宗进[1] 王新立[1]

机构地区：[1]河南省中医院(河南中医学院第二附属医院)骨科脊柱病区,郑州450002

出　　处：《临床与实验病理学杂志》

年　　份：2015

卷　　号：31

期　　号：12

起止页码：1374-1378

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD2015_2016、IC、JST、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨microRNA-204(miR-204)在强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)成纤维细胞中的表达及其对BMP-2和TGF-β1诱导的成骨分化的功能及其可能的作用机制。方法收集5例骨AS和5例非AS的髋关节囊组织;采用原代细胞培养方法分离培养成纤维细胞;细胞实验分为4组,分别为正常对照组、AS对照组、AS+miRNA-NC组和AS+miR-204组;除了正常对照组和AS对照组外,AS+miRNA-NC组、AS+miR-204组的培养基中分别加入7 ng/ml的BMP-2和5 ng/ml的TGF-β1;miRNA-NC和miR-204 mimics采用脂质体Lipofectamine 2000进行转染;实时荧光定量PCR法检测miR-204、I型胶原(collagen type I,Col I)、骨钙素(osteopontin,OPN)和核心结合蛋白因子2(Runx2)mRNA的表达水平;Western blot法检测Runx2蛋白表达水平;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒检测ALP活性;双荧光素酶报告基因检测miR-204与Runx2的靶向调控关系。结果 miR-204在AS来源的成纤维细胞及BMP-2和TGF-β1处理的细胞中表达降低。过表达miR-204可以显著抑制BMP-2和TGF-β1诱导的ALP活性增高,ColⅠ和OPN的表达水平上升。另外,miR-204可以靶向调控Runx2,并且抑制Runx2的表达水平。结论 miR-204与AS成纤维细胞成骨分化密切相关,其可以通过靶向调控Runx2的表达来调节成纤维细胞的骨化,为AS的治疗提供潜在的治疗靶点。

关 键 词：强直性脊柱炎 miR-204  成骨分化 成纤维细胞

分 类 号：R681.51]