文献类型：期刊文章

作　　者：刘晓静[1] 钱昌丽[2] 周志华[2] 黄勇平[3] 李木旺[1,4] 王倩[3] 王钱福[2]

机构地区：[1]江苏科技大学蚕业研究所,江苏镇江212018 [2]中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所合成生物学重点实验室,上海200032 [3]中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所昆虫发育与进化生物学重点实验室,上海200032 [4]中国农业科学院蚕业研究所,江苏镇江212018

出　　处：《微生物学通报》

基　　金：国家自然科学基金项目(No.31300071;31172153;31472046);上海自然科学基金项目(No.13ZR1446600)

年　　份：2015

卷　　号：42

期　　号：12

起止页码：2337-2344

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2015_2016、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：【目的】对短角球白蚁(Globitermes brachycerastes)肠道元基因组文库中筛选得到的一个新型β-葡萄糖苷酶编码基因bgl17进行酶学性质研究。【方法】通过克隆与异源表达得到纯的Bgl17酶蛋白,根据Bgl17对底物的水解活性测定其稳定性及动力学参数,利用薄层层析确定其水解产物。【结果】该酶属于糖基水解酶第一家族(GHF1),对其特异性底物4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(p NPGlc)的最适反应温度为70°C,最适p H为5.0。在最适反应条件下,该酶以p NPGlc为底物比活力为115.69 U/mg,以水杨苷为底物比活力为297.39 U/mg。以p NPGlc为底物时,其动力学参数Km值和Vmax分别为0.81 mmol/L和227.27μmol/(m L·min)。在稳定性方面,该酶在50°C处理1 h仍可保持50%的活性,在p H 5.0和6.0条件下,该酶的半衰期为1 h。【结论】该酶在较高的温度下具有较高的活性,且对水杨苷水解活性高,这点不同于已知的β-葡萄糖苷酶,推测其更有利于木质纤维素复杂结构的降解;该酶的最适温度远高于白蚁生存环境温度,可为研究白蚁降解纤维素的机理提供参考。

关 键 词：短角球白蚁肠道  元基因组  Β-葡萄糖苷酶 糖基水解酶第一家族  水杨苷  

分 类 号：Q55]