文献类型：期刊文章

作　　者：唐玉林[1,2] 米子岚[1] 钟活权[3] 江年琼[1,3]

机构地区：[1]深圳大学生命与海洋科学学院,深圳518060 [2]深圳市海洋生物资源与生态环境重点实验室,深圳518060 [3]深圳市微生物基因工程重点实验室,深圳518060

出　　处：《深圳大学学报（理工版）》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30770184);深圳市科技计划资助项目(JCYJ20140724165855348)~~

年　　份：2015

卷　　号：32

期　　号：6

起止页码：610-616

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2014、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2015_2016、EI、IC、INSPEC、JST、MR、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、ZMATH、核心刊

摘　　要：为了体外获得可溶性的拟南芥AtRD22蛋白,以拟南芥叶片提取的总核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)为模版,反转录获得AtRD22的全长互补脱氧核糖核酸(complementary deoxyribonucleic acid,c DNA),分别构建AtRD22的原核重组表达载体p ET32a-RD22和p SUMO-RD22,并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行AtRD22蛋白的表达.在0.3 mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-dithiogalactopyranoside,IPTG)诱导下,探索不同培养温度和诱导时间对可溶性蛋白表达的影响.结果表明,在实验条件下,转化p ET32a-RD22的重组菌表达AtRD22蛋白的总量高于转化p SUMO-RD22的重组菌,但后者的可溶性AtRD22蛋白表达量明显高于前者.当诱导温度为28或16℃,时间分别为6.0或8.0 h以上时,转化p SUMO-RD22的重组菌中可溶性目的蛋白的表达量相对较大.为进一步在体外研究AtRD22蛋白质的结构和功能奠定了基础.

关 键 词：蛋白质工程 拟南芥AtRD22  融合标签 小泛素相关修饰物  基因克隆  原核表达  

分 类 号：Q943.2[植物生产类] Q786