文献类型：期刊文章

作　　者：张小明[1,2] 勾雪娇[1,2] 梁鹏[3] 林华明[4] 赵晋洁[1] 胡向阳[1]

机构地区：[1]中国科学院昆明植物研究所西南野生生物种质资源库,云南昆明650201 [2]中国科学院大学,北京100049 [3]深圳华大基因科技服务有限公司,广东深圳518083 [4]广州基迪奥生物科技有限公司,广东广州510224

出　　处：《云南大学学报（自然科学版）》

基　　金：国家自然科学基金(31470348)

年　　份：2015

卷　　号：37

期　　号：6

起止页码：909-915

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2015_2016、IC、JST、MR、RCCSE、ZGKJHX、ZMATH、核心刊

摘　　要：DNA提取是拟南芥突变体筛选与鉴定中的关键环节.结合拟南芥突变体鉴定特点和DNA提取特点,对传统SDS法进行改良,摸索出一种简易、快速且经济的DNA提取方法,并将其应用到突变体的批量筛选与鉴定中.使用该方法可在常温下利用10 mg左右拟南芥叶片,以少量试剂,通过简单的研磨、离心、沉降和干燥等步骤便能快速制备用于PCR检测的DNA模板.采用本方法个人提取单个样品DNA仅需15 min左右,每小时可提取48个DNA样品.研究采用该方法提取了一批待鉴定拟南芥突变体的DNA样品,利用三引物法对其进行PCR检测,结果表明DNA样品浓度高,DNA扩增成功率高达100%,且目的条带清晰,说明该方法在拟南芥突变体的筛选和鉴定上是适用且高效的,可广泛应用于实验室突变体库的建立.

关 键 词：拟南芥 DNA提取 SDS抽提法  聚合酶链式反应 突变体鉴定  三引物法  

分 类 号：Q94-336[植物生产类]