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大鼠脑皮质星形胶质细胞的体外优化培养及鉴定
The optimized culture and identification of astrocytes from rat cortical tissue
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]西安交通大学医学部人体解剖与组织胚胎学系,陕西西安710061 [2]西安交通大学医学部神经生物学研究所,陕西西安710061
基 金:陕西省自然科学基金资助项目(No.2012JQ4011;2014JM4096);中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(No.xjj2012011)~~
年 份:2015
卷 号:36
期 号:6
起止页码:849-853
语 种:中文
收录情况:AJ、BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD_E2015_2016、EMBASE、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的旨在获得高纯度的星形胶质细胞,并对不同培养时期的细胞进行鉴定,为进一步研究奠定基础。方法常规分离新生SD大鼠大脑皮质并制备单细胞悬液,采用差速黏附加摇床震荡法对所获得的细胞进行纯化。倒置相差显微镜及HE染色观察细胞形态,GFAP免疫荧光对获得细胞进行鉴定。结果原代培养的皮质细胞从3d开始迅速增殖,9-12d即可铺满瓶底,此时细胞呈明显的分层生长,星形胶质细胞位于底层,形态多样,阳性率为(67.2±7.1)%;经过1次传代后,GFAP阳性率有所提升(84.0±6.0)%,但不能完全去除小胶质细胞及少突胶质细胞,细胞仍呈分层生长;至第3次传代后,获得大量几乎为单一种类的星形胶质细胞,其胞体较大、突起较短粗,一般2-3个,胞核圆形或椭圆形,常偏于一侧,GFAP染色呈强阳性,阳性率可达(97.6±2.4)%。结论通过差速黏附与摇床震荡相结合的方法,获得了高纯度且生长状态良好的星形胶质细胞。
关 键 词:星形胶质细胞 大脑皮质 细胞培养 大鼠
分 类 号:Q25]
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