文献类型：期刊文章

作　　者：何汉文[1] 王葱[2] 杜博易[2] 吴璇[1] 于莉[1] 汪旻旻[1] 黄升海[1]

机构地区：[1]安徽医科大学基础医学院生物学教研室,合肥230032 [2]安徽医科大学生命科学学院

出　　处：《安徽医科大学学报》

基　　金：安徽高校省级自然科学研究重点项目(编号:KJ2012A152);安徽省自然科学基金(编号:1308085MH129);安徽省级大学生创新创业训练计划项目(编号:AH201410366135)

年　　份：2015

卷　　号：50

期　　号：11

起止页码：1560-1565

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、CSA-PROQEUST、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨Toll样受体7(TLR7)在呼吸道合胞病毒(RSV)感染A549细胞诱导产生I型干扰素(IFN)抗病毒免疫反应中的作用。方法实验分正常对照组、RSV感染组、TLR7 siRNA沉默组,分别于感染的4、8、12、24 h后收集各组细胞以及培养上清液。TLR7 siRNA通过瞬时转染A549细胞,半定量RT-PCR法检测TLR7基因沉默效果;TRIzol试剂提取细胞总RNA,检测TLR7、干扰素调节因子7(IRF7)、IFN-α、IFN-β的mRNA表达量变化;通过Western blot法检测TLR7蛋白表达量;ELISA法检测感染不同时间点A549细胞培养上清液中IFNα/β含量的变化。结果 1转染24h后TLR7 siRNA-2有效抑制TLR7 mRNA表达;2 RSV感染A549细胞后,TLR7、IRF7、IFN-α/β的mRNA以及TLR7蛋白的表达量均升高,并与RSV感染之间存在时间依赖性关系;沉默TLR7后,TLR7、IRF7、IFN-α/β的mRNA以及TLR7蛋白的表达量较感染组均有明显下降;3 RSV感染A549细胞后,明显上调细胞培养上清液中IFN-α/β的水平,TLR7siRNA沉默组IFN-α/β的表达水平较RSV感染组均下降,差异有统计学意义,且IFN-α的表达量下调更为显著。结论RSV感染A549细胞后,TLR7被活化能够诱导产生I型IFN,发挥抗病毒作用,且TLR7诱导产生的I型IFN以IFN-α为主。

关 键 词：呼吸道合胞病毒 A549细胞 TOLL样受体7 siRNA  Ⅰ型干扰素  

分 类 号：R373.14]