文献类型：期刊文章

作　　者：李雅微[1,2,3] 王磊[2,3] 张国强[2,3] 夏焕章[1] 邹检平[2,3]

机构地区：[1]沈阳药科大学,辽宁沈阳110016 [2]北京健平金星生物科技有限公司,北京100085 [3]北京健平九星生物医药科技有限公司,北京100085

出　　处：《中国生物制品学杂志》

年　　份：2015

卷　　号：28

期　　号：9

起止页码：938-942

语　　种：中文

收录情况：AJ、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2015_2016、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的研制血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）化学发光免疫测定试剂盒,并对该试剂盒进行验证。方法以试剂盒的技术指标和血清检测结果为参考依据,建立检测方法,确定检测范围,并对包被抗体（1∶500、1∶1 000和1∶2 000倍稀释）及酶标抗体浓度（1∶3 000、1∶5 000、1∶6 000和1∶8 000倍稀释）、包被温度（室温和4℃）、封闭液成分（1%小牛血清、1%和0.5%牛血清白蛋白）及干燥方法（超净台吹干和使用真空干燥机进行干燥）进行优化;同时对试剂盒的线性、检出限、精密性、准确度、特异性及热稳定性进行验证;采用本试剂盒对139例非肿瘤人群和100例肿瘤患者的血清样本进行初步检测。结果方法的最佳检测条件为：包被抗体浓度为1∶1 000,酶标抗体浓度为1∶3 000,对血清样本的检测范围为6.25～800 pg/ml,最佳包被浓度为4℃,最佳封闭液成分为0.5%牛血清白蛋白,最佳干燥方法为真空干燥法。试剂盒线性相关系数r〉0.99,校准曲线各点偏差的绝对值〈10%,最低检出限≤3.125 pg/ml,空白检出限≤3.125 pg/ml,批内差异〈5%,批间差异〈7%,回收率为85%～99%;特异性检验结果为本试剂盒对EGF、FGF-2、PDGF-AA、Pl GF-1、Pl GF-2、HGF、TNF-α、TNF-β检测的交叉反应率≤0.52%;经37℃保存3、7 d后,试剂盒线性相关系数r〉0.99,空白检出限≤3.125 pg/ml,批内差异〈8%,回收率为80%～82%。139例非肿瘤人群和100例肿瘤患者的血清样本中VEGF的中位水平（M）分别为44.6和83.4 pg/ml。结论本研究开发的试剂盒具有较高的准确性、灵敏性、特异性,适用于血清VEGF的临床检测,具有较好的临床应用前景。

关 键 词：血管内皮生长因子 化学发光免疫分析

分 类 号：R392-33]