文献类型：期刊文章

作　　者：石佳宁[1] 韩晓健[1] 吕福莲[1] 毕冬梅[1] 金艾顺[1]

机构地区：[1]哈尔滨医科大学基础医学院免疫学教研室,150081

出　　处：《国际免疫学杂志》

基　　金：国家自然科学基金面上项目（81171973）

年　　份：2015

卷　　号：38

期　　号：5

起止页码：403-408

语　　种：中文

收录情况：CAS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的建立高效表达全人源抗人肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体受体（TRAIL）-R1单克隆抗体（TR1-404）蛋白体系，并评价TR1-404抗体蛋白功能特性。方法构建pcDNA3．4载体抗体质粒，转染Expi293F^TM细胞，表达抗体蛋白。收集细胞培养上清，使用ProteinA／G纯化抗体蛋白。利用双抗体夹心和间接酶联免疫吸附试验（ELISA）检测抗体蛋白浓度及特异性。流式细胞分析检测TRl_404与Hela细胞和HCT116细胞表面TRAIL-R1的结合能力。MTT法检测在不同时间点TR1-404、TRAIL及二者联合作用对Hela细胞和HCT116细胞生存和增殖的影响。Annexin V／PI双染色检测Hela细胞和HCT116细胞凋亡。结果成功构建pcDNA3．4载体抗体质粒和建立Expi293F^TM细胞蛋白高效表达系统。精制的TR1-404抗体既与重组TRAIL-R1抗原特异性结合，也能与Hela和HCT116细胞表面的TRAIL-R1结合。发现TR1-404联合TRAIL作用于Hela细胞，肿瘤细胞凋亡效果显著提高。而在HCT116细胞中，TRAIL与TR1-404的联合作用未见显著提高。结论成功建立抗体蛋白高效表达系统。TR1-404抗体特异性与TRAIL-R1抗原结合。TR1-404抗体提高TRAIL诱导的Hela细胞凋亡作用。本研究为TRAIL—R1靶向的抗肿瘤治疗研究提供新方法。

关 键 词：肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体 肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体受体  单克隆抗体 凋亡

分 类 号：R730.5]