文献类型：期刊文章

作　　者：武天慧[1] 彭睿[2] 彭惠民[3] 罗勇军[4] 姚莉[1] 孙艳[1] 尹频[1] 文利[1] 张政[1]

机构地区：[1]重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室,重庆400016 [2]重庆医科大学基础医学院生物信息学教研室,重庆400016 [3]重庆医科大学基础医学院实验教学中心,重庆400016 [4]第三军医大学高原军事医学系军事医学地理学教研室,重庆400038

出　　处：《第三军医大学学报》

基　　金：国家自然科学基金面上项目(81270912);重庆市科委资助项目(CSTC2013jcyjA 10044)~~

年　　份：2015

卷　　号：37

期　　号：18

起止页码：1823-1829

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2014、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2015_2016、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨微小RNA(microRNA,miRNA)对非小细胞肺癌细胞增殖的作用及调控机制。方法 Lipofectamine 2000转染已构建成功的miR-451真核表达载体至非小细胞肺癌细胞A549,通过MTT检测肺癌细胞增殖状况,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,运用生物信息学技术对miR-451预测靶基因进行GO分析和KEGG信号途径分析,对炎症相关的预测靶基因PSMB8进行进一步的验证。构建含有PSMB8 3'UTR野生型和突变型质粒,通过双荧光素酶检测A549细胞PSMB8表达水平,Western blot检测PSMB8和NOS2的表达情况。结果 MTT结果显示过表达miR-451能显著抑制A549细胞增殖。流式细胞术检测发现miR-451组细胞阻滞在G2期,而细胞凋亡未见明显差异。GO分析发现miR-451预测靶基因涉及PSMB8、CAB39、YWHAZ等17个基因,PSMB8主要参与细胞代谢调控,细胞周期与细胞增殖;KEGG信号途径分析结果显示靶基因主要涉及microRNA在细胞周期、PI3KAKT、m TOR等信号通路。17个miR-451预测靶基因进行生物信息学研究发现PSMB8含有miR-451的结合位点,且在多个物种中呈高度保守。荧光素酶活性检测发现,过表达miR-451可抑制PSMB8荧光素酶活性表达。Western blot结果发现过表达miR-451的A549细胞PSMB8呈下调,而低表达miR-451的正常支气管上皮16HEB细胞PSMB8呈上调。Western blot和细胞荧光免疫化学检测发现炎症因子NOS2在肺癌中表达也降低。结论 miR-451可能通过靶向炎症相关基因PSMB8/NOS2调控非小细胞肺癌细胞增殖,并参与肺癌的发生与发展。

关 键 词：肺癌 微小RNA 细胞增殖

分 类 号：R394-33] R730.23[基础医学类]